Способы получения хроматограмм

Подвижную фазу, вводимую в слой неподвижной фазы, называют элю-ентом, а подвижную фазу, выходящую из колонки и содержащую разделен-ные компоненты – элюатом. В элюате тем или иным способом определяют содержание компонентов. Распределение разделяемых веществ в виде отдель-ных полос (зон) вдоль колонки представляет собой внутреннюю хромато-грамму. Графическое изображение (часто получаемое с помощью самописца) распределения веществ в элюате называют внешней хроматограммой.

По способу получения хроматограмм различают элюентную, вытесни-тельную и фронтальную хроматографию.

Элюентная (проявительная) хроматография.

Хроматографическую колонку промывают элюентом (раствором или растворителем), обладающим меньшей сорбируемостью, чем любые из разде-ляемых веществ. Затем в колонку вводят разделяемые вещества, растворен-ные в элюенте, и продолжают непрерывно пропускать элюент (процесс элюи-рования). При этом разделяемые вещества перемещаются вдоль колонки с разными скоростями в соответствии с их сорбируемостью.

Если скорости перемещения компонентов достаточно различаются, то на выходе из колонки сначала появляется наименее сорбируемый компонент, затем следующий и т.д. В этом случае хроматограмма представляет собой

несколько пиков. Элюентная хроматография – наиболее распространенный способ хроматографирования.

Вытеснительная хроматография. Сначала в колонку вводят небольшоеколичество раствора разделяемых веществ. Затем через колонку непрерывно пропускают раствор вещества (вытеснитель), обладающего большей сорбиру-емостью, чем любое из разделяемых веществ.

По мере продвижения по колонке элюент вытесняет вещество С, кото-рое в свою очередь вытесняет вещество В и т.д. В результате анализируемая смесь перемещается впереди фронта вытеснителя и скорость движения ве-ществ равна скорости движения вытеснителя. Разделяемые вещества и на ко-лонке, и в элюенте располагаются последовательно друг за другом. Каждый компонент выделяется в чистом виде, но не количественно, так как зоны компонентов не разделены промежутками чистого сорбента.

Фронтальная хроматография. В колонку непрерывно вводят растворразделяемых веществ, сорбируемость которых увеличивается в ряду А<B<C. Из колонки сначала будет вытекать чистый растворитель, затем когда сорбент насытится наименее сорбируемым веществом А, оно появится в элюате. Когда сорбент насытится веществом В, элюат будет содержать оба эти веще-ства и т.д. Когда же сорбент будет полностью насыщен всеми компонентами смеси, состав элюата совпадает с составом раствора, вводимого в колонку. При фронтальном способе получения хроматограммы в чистом виде можно выделить лишь одно вещество. Однако внешняя хроматограмма дает пред-ставление о числе компонентов в анализируемом растворе.