Серологическая диагностика. Биопроба. Используют преимущественно для очистки смешанных культур при диаг­ностике генитального кампилобактериоза

Биопроба. Используют преимущественно для очистки смешанных культур при диаг­ностике генитального кампилобактериоза. Морских свинок массой 250-300 г заражают внутрибрюшинно, вводя 1,0-1,5 мл смешанной культуры кампилобактерий. Через 5-10 минут из сердца берут кровь и высевают в 6-8 пробирок с ПЖА. При значительной контаминации возможно проведение нескольких пассажей.

Белым мышам культуру вводят внутрибрюшинно в дозе 0,3-0,5 мл. Через 3-4 дня животных убивают и кровь из сердца, материал из печени, селезенки, рогов матки высевают на питательные среды.

Крупным белым мышам культуру в дозе 0,1 мл вводят пипеткой в ваги­ну. Через 24 часа заражение повторяют. Через 6-7 дней мышей убивают, вырезают стерильно кусочки рогов матки и засевают материал в пробирки с ПЖА.

Беременным морским свинкам вводят внутрибрюшинно или во влага­лище 0,5 мл культуры. При аборте производят посевы из абортированных плодов. Если аборт не происходит, животных убивают и делают посевы из эмбрионов и слизистой матки.

Для выявления секреторных антител при генитальном кампилобактериозе крупного рогатого скота применяют реакцию агглютинации с влагалищ­ной слизью (РАВС).

Техника постановкиа РАВС. Используют кампилобактериозный анти­ген биофабричного производства (C.fetus subsp. venerealis), который разво­дят 3%-ным раствором NaCI с 0,3% формалина до концентрации
1 млрд.м.к./мл (1:10). Тампон с вагинальной слизью выдерживают в бактериологичес­кой пробирке с 5 мл стерильного раствора NaCI (3%) в течение 12-14 часов при 4°С. Тампон отжимают, жидкость центрифугируют при 3000 об/мин 30 минут. Надосадочную жидкость исследуют в следующих разведениях: неразведенный экстракт, 1:2, 1:4, 1:8. Средой разведения служит 3%-ный ра­створ NaCI. К 0,5 мл каждого разведения исследуемого экстракта добавля­ют 0,5 мл взвеси антигена. Контролями служат: антиген (0,5 мл) + 0,3%-ный раствор NaCI (0,5 мл); разведения диагностической агглютинирующей сы­воротки против C.fetus subsp. venerealis (1:50-1:400) + 0,5 мл антигена; раз­ведение нормальной кроличьей сыворотки (1:100,1:200) + 0,5 мл антигена. Опытные и контрольные пробирки после встряхивания помещают в термо­стат на 24 часа при 37° С. Через 3-6 часов выдерживания компонентов при комнатной температура учитывают результат по общепринятым для РА кри­териям. Положительным результатом считается наличие РА на + + +, + + + + креста во всех или в первой и второй пробирках. Как сомнительный резуль­тат оценивают наличие РА на (+ +) или (+) крест в первой и второй пробир­ках. Отрицательный результат: отсутствие агглютинации во всех пробир­ках. У овец серологическую диагностику проводят при помощи пробироч­ной РА. Сыворотку крови исследуют в разведениях 1:100,1:200 и 1:400. Как положительный результат оценивают РА на четыре-три креста в разведении 1:200, сомнительный — на четыре-три креста в разведении 1:100 или на два-один крест в разведении 1:200. Сыворотки крови от вакцинированных жи­вотных не исследуют.