1. Исследование адгезивной способности фагоцитирующих клеток - определяется 1) путем микроскопического подсчета адгезировавшихся к пластику клеток, 2) по наличию на мембране адгезивных молекул с помощью МКА (проточная цитометрия).
2. Исследование хемотаксической активности фагоцитов - определяется в камере Бойдена путем подсчета числа клеток, прошедших через поры мембранного фильтра.
3. Исследование поглотительной способности фагоцитов - определяется путем микроскопического определения числа фагоцитирующих различные объекты клеток. Определяются 2 показателя: фагоцитарный показатель (или индекс) и фагоцитарное число.
4. Исследование наличия и активности ферментов (миелопероксидазы, каталазы и др.) - цитохимический метод с оптической денситометрией.
5. Исследование содержания лизоцима - определение лизоцима в лизате суспензии нейтрофилов по лизису микрококка.
6. Исследование дефензинов - ИФА
7. Исследование бактерицидного эффекта - посев бактериальной культуры до внесения в суспензию фагоцитов и после инкубации с фагоцитами (15 -30 - 60 -120 мин)
|
|
8. Исследование метаболической активности - NST-тест
ГЛАВНЫЙ КОМПЛЕКС ГИСТОСОВМЕСТИМОСТИ
Номенклатура главного комплекса гистосовместимости
ГКГС - в русской транскрипции,
MHC - M ajor H istocompatibility C omplex,
HLA - H uman L eukocyte A ntigens
Н2 - МНС мыши
Антиген-специфические Т-лимфоциты не представляют антиген в свободной или растворимой форме, но представляют часть (порцию) протеинового антигена (т.н. пептид) нековалентно связанный с молекулами-продуктами МНС-генов
1. МНС-молекулы являются мембраносвязанными и не секретируются. Существует ограничение активации Т-лимфоцитов тем, что Т-лимфоциты взаимодействуют только с клетками, несущими МНС-молекулы, но не с растворимыми антигенами.
2. Характер связи антигена с молекулами I и II класса МНС определяет типы Т-лимфоцитов, активированные разными формами антигенов. Пептидные фрагменты экстрацеллюлярных белков обычно связываются с молекулами II класса МНС, эндогенные пептиды (пептиды цитозоля) - с молекулами I класса МНС.
3. И ммунный ответ определяется экспрессией молекул МНС, которые связывают и презентируют пептидные фрагменты Т-клеткам. МНС-гены высоко полиморфны, причем разные аллеи отличаются степенью связывать и презентировать антигенные детерминанты. Это - первый путь контроля иммунного ответа МНС-генами.
4. Зрелые Т-лимфоциты не способны отвечать на собственные антигены. Репертуар антигенного распознавания зрелыми Т-лимфоцитами определен позитивной селекцией созревающих тимических Т-лимфоцитов для чужеродных антигенов и элиминацией (негативной селекцией) Т-клеток для собственных антигенов. МНС молекулы могут воздействовать на иммунную отвечаемость на отдельные антигены, создавая репертуар зрелых Т-лимфоцитов.
|
|
Схема строения молекул I класса МНС II класса МНС
Пептидсвязывающая область | a1-цепь a2-цепь | a1-цепь b1-цепь | |
Иммуноглобулин подобная область | b2-микроглобулин a3-цепь | a2-цепь b2-цепь | |
Трансмембранная область | |||
Цитоплазматическая область | |||
Свойства молекул | |||
Презентирующие клетки | Все ядросодержащие клетки | Только антигенпрезентирующие клетки: макрофаги, дендритные клетки, эндотелиальные клетки, В-лимфоциты | |
Транскрипция и экспрессия | Координированная регуляция | ||
Фактор, определяющий экспрессию молекул на клетках | Уровень транскрипции, контролируемый в свою очередь цитокинами | ||
Функции | обеспечение тканевой индивидуальности | регуляция иммунного ответа | |
Роль цитокинов в экспрессии молекул МНС | a-, b-, g-интерфероны, TNF и лимфотоксин усиливают экспрессию молекул МНС I класса в одинаковой степени на всех клетках | Разные цитокины оказывают разный эффект в отношении разных типов клеток: g-интерферон и синергичные ему цитокины увеличивает экспрессию на мононуклеарах, IL-10 оказывает противоположный эффект. Дендритные и эндотелиальные клетки отвечают только на g-интерферон, эффект от др. цитокинов отсутствует. В-лимфоциты: ингибирующий эффект g-интерферона и стимулирующий - IL-4. |