Методы обнаружения сапонинов в ЛРС

Для обнаружения сапонинов в ЛРС используются реакции, основанные на:

1. физических;

2. химических;

3. биологических свойствах этих веществ.

Для качественных реакций на сапонины готовят водное извлечение из ЛРС (1:10) на кипящей водяной бане в течение 10 минут, после охлаждения и фильтрации проводят необходимые реакции.

Реакции, основанные на физических свойствах

Реакция пенообразования: При встряхивании в пробирке водного извлечения образуется довольно устойчивая пена.

По пенообразованию ориентировочно определяется и групповая принадлежность сапонинов. Для проведения реакции водное извлечение из ЛРС делят на две части: первую подкисляют до рН=1, вторую подщелачивают до рН=13. Оба раствора в пробирках встряхивают. Наблюдают образование столбиков пены. Если в обеих пробирках образуется примерно равные по величине и стойкости столбики пены или в пробирке с кислой средой, то сырье содержит тритерпеновые сапонины, если столбик пены больше при щелочном рН, то - стероидные.

Схема 6

Реакции, основанные на химических свойствах

1) Реакции осаждения:

· Из водных растворов сапонины осаждаются гидроксидом бария или магния, солями меди, ацетатом свинца, причем тритерпеновые сапонины осаждаются средним ацетатом свинца, а стероидные - основным.

· Из спиртовых извлечениий стероидные и тритерпеновые сапонины осаждаются спиртовым раствором холестерина в виде комплексов - холестеридов.

2) Цветные реакции:

· реакция Либермана-Бурхарда: сухой остаток растворяют в ледяной уксусной кислоте и добавляют смесь уксусного ангидрида с концентрированной серной кислотой (50:1). Наблюдают розовое окрашивание, переходящее в зеленое, а затем в синее;

· реакция с 10% раствором нитрита натрия и концентрированной серной кислотой, наблюдают кроваво-красное окрашивание;

· реакция Лафона: к водному извлечению прибавляют конц. H2SO4 и этиловый спирт (в равных объемах), затем прибавляют каплю раствора сернокислого железа. При нагревании появляется сине-зеленое окрашивание;

· реакция с серной кислотой: к извлечению прибавляют равный объем хлороформа и 6-8 капель концентрированной серной кислоты. Наблюдают окрашивание нижнего хлороформного слоя в желтый цвет.

· стероидные сапонины можно отличить от тритерпеновых по реакции Санье: с 1% раствором сурьмы трёххлористой, кислотой конц. серной, содержащей уксусный ангидрид, образуется жёлтое окрашивание.