Исследуемый материал:
Посев на плотные среды: чашка с кровяным агаром, чашка с бензидиновым агаром, чашка со средой Виллиса-Хоббс, пробирки со средой Вильсон-Блера Инкубация в анаэробных условиях при 37° в течение 1-7 суток. | Посев на жидкие среды для накопления (мясные, казеиновые). Инкубация при 37° в течение от 16 часов до 15 суток. Выросшие культуры, содержащие массу грамположительных палочек, пересевают на плотные среды, как указано. |
Микроскопия и пересев на мясную или казеиновую среду колоний, вызывающих гемолиз, покраснение, опалесценцию или почернение на одной из указанных сред и состоящих из грамположительных палочек, для получения чистых культур и последующего изучения их свойств.
Среда Виллиса-Хоббс: смесь (400 мл бульона Хоттингера + 4,8 грамма агара; 4,8 грамма лактозы и 1,3 мл 1% раствора нейтрального красного) автоклавируют, охлаждают до 55-50 и добавляют 15 мл суспензии яичного желтка и 60 мл стерильного обезжиренного молока.
2. Причины высокой чувствительности строгих анаэробов к кислороду объясняют следующими обстоятельствами:
|
|
1. Отсутствием у них каталазы (в присутствии кислорода накап-
ливается перекись водорода, которая и оказывает бактерицидное
действие на анаэробы).
2. В аэробных условиях тормозятся анаэробные энергетические
процессы (пастеровский эффект).
3. Отсутствием у анаэробов систем регуляции окислительно-
восстановительного потенциала. В присутствии кислорода он повы-
шается, анаэробы не могут понизить его до необходимого уровня, и
поэтому их рост подавляется.
З А Н Я Т И Е6
Дата ______________
Тема: Бактериологический метод (3 день). Идентификация чистых культур бактерий. Биохимическая активность бактерий.
Итоговое контрольное занятие «Морфология и физиология бактерий».
План занятия:
1. Ферменты бактерий. Регистрация результатов посева на среды пестрого ряда.
2. Регистрация результатов опыта с посевами бактерий на среды Эндо, Плоскирева и МПА.
3. Итоговый контроль по теме «Морфология и физиология бактерий».
Методические указания
1. Зарегистрировать результаты посева на среды «пестрого ряда» кишечной палочки и фекального щелочеобразователя. Ферментация углевода с образованием кислоты и газа обозначается буквами КГ; с образование только кислоты - буквой К. Свертывание молока и образование индола обозначается +; отсутствие ферментации углевода, свертывания молока или образования индола и сероводорода обозначается знаком -.