2015-04-23
931
Перед окрашиванием срезы депарафинируют и доводят до воды в спиртах нисходящей крепости, после чего стекло со срезами помещают в водный раствор красителя. Клеточные структуры, как правило, не различимы даже при большом увеличении микроскопа, они бесцветны и прозрачны. Для выявления тканевых компонентов, отдельных клеток и клеточных структур с 50‑х годов прошлого века используют красители — лиганды с высоким сродством к различным компонентам ткани и с определёнными цветооптическими свойствами. Способность тканевых компонентов по-разному окрашиваться зависит от кислотно-основных (щелочных) свойств веществ, входящих в их состав. Для электронной микроскопии материал контрастируют солями тяжёлых металлов, используют преимущественно цитрат свинца и уранилацетат.
Кислые красители
Эозин, конгорот, разные оранжи связываются со структурами или веществами, имеющими щелочную реакцию. Это — ацидофильные (основные) компоненты ткани [например, разные цитоплазматические белки (типичный пример — гемоглобин эритроцитов)].
|
|
|
Щелочные красители
Гематоксилин, метиленовый синий, толуидиновый синий, азур связываются с базофильными (кислыми) компонентами ткани (например, нуклеиновые кислоты ядра и рибосом).
Стандартные красители
Часто используют смеси кислых и щелочных красителей (например, гематоксилин + эозин). В гематологической практике мазки и срезы окрашивают специальными смесями (гематологические красители).
ГИСТОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ
Гистохимические методы позволяют установить локализацию определённых веществ или биохимических процессов в тканевых и клеточных структурах. Для проведения гистохимической реакции обычно используют криостатные срезы, реже — срезы лиофилизированной ткани. О локализации исследуемого вещества судят по отложению окрашенного продукта реакции. Более высокого разрешения добиваются при электронной микроскопии (цитохимические методы). В этом случае применяют специальные методы подготовки объекта (криоультрамикротомия, замещение в замороженном состоянии, инертное обезвоживание и др.).
