Натрия оксалат

Приготовление раствора и его использование. 300 мг щавелевокислого натрия растворяют в 20 мл бидистиллированной воды. Используют 0,1 мл раствора на 2 мл крови. Иногда в пробирку на кончике скальпеля вносят сухой порошок натрия оксалат или калия оксалат (примерно 0,01 г).

Такой антикоагулянт нельзя использовать для определения электролитов (калий, натрий, кальций), щелочная фосфатаза, α-амилаза, рН крови.

Аммония оксалат используется редко.

Лимоннокислый натрий (тринатрийцитрат)

Приготовление раствора и его использование. Водный раствор концентрации 38г/л (с учетом навески кристаллизационной воды). Хранят в стеклянной бутылке с притертой пробкой, лучше в холодильнике при t 4⁰C. 1 объем раствора лимоннокислого натрия добавляют к 9 объемам крови.

Лабораторные тесты, определению которых мешает применяемый антикоагулянт: α-амилаза крови.

Этилендиамин-тетрауксусная кислота или ее динатриевая соль: ЭДТА-натрий (синонимы: селектон Б, хелатон, версен, трилон Б).

Приготовление раствора и его использование. 3 мг натрия этилендиамин-тетраацетата (динатриевая соль) растворяют в 20 мл бидистиллированной воды. На 2 мл крови берут 0,1 мл раствора, содержащего 1,5 мг антикоагулянта. Допускается всыпать ЭДТА в пробирку из расчета 1 мг порошка на 1 мл крови.

Преимущество – при морфологическом исследовании крови не сморщивает эритроциты.

Лабораторные тесты, определению которых мешает применяемый антикоагулянт: электролиты (калий, натрий, кальций), остаточный азот.

Гепарин (с активностью 1000 ЕД в 1 мл).

Приготовление раствора и его использование: 0,01 мл используют на 5 мл крови или 3 капли гепарина – на 10 мл.

Лабораторные тесты, определению которых мешает применяемый антикоагулянт: щелочная фосфатаза (снижение).

Соли гепарина (натрия гепаринат, калия гепаринат, лития гепаринат, аммония гепаринат) применяются редко.

Цитратно-глюкозная смесь (применяется для исследования метаболических, ферментативных процессов в эритроцитах, а также для определения активности кислой фосфатазы). Сложный антикоагулянт, готовиться специально.

Приготовление раствора и его использование. 4,7 г лимонной кислоты (химически чистой), 16 г трехзамещенного натрия цитрата, 25 г глюкозы растворяют в 1000 мл бидистиллированной воды. Берут 1 часть раствора на 4 части крови (учитывают разведение). Приведенные количественные соотношения могут быть уменьшены соответственно в 10 или другое количество раз.

Лабораторные тесты, определению которых мешает применяемый антикоагулянт: электролиты (калий, натрий, кальций), глюкоза.

Для получения сыворотки антикоагулянты не добавляют. Полученную кровь в пробирках, закрытых пробками, выдерживают некоторое время при t 37⁰С 10-15 минут. Затем осторожно проводят проволокой или стеклянной палочкой по внутренней стенке пробирки, чтобы ускорить получение сыворотки. Удерживая сгусток стеклянной палочкой, сыворотку сливают в центрифужную пробирку и центрифугируют. Получают бесцветную или желтоватую сыворотку.

Если сыворотка мутная, белая непрозрачная, это означает, что кровь была взята сразу после кормления, и ее использовать нельзя.

Если сыворотка розовая или красная, это означает, что в тромбе разрушились эритроциты и такую кровь для анализа использовать нельзя (кроме определения глюкозы).

Если сыворотку необходимо получить немедленно, то кровь центрифугируют сразу 15 мин при 1500 оборотов или 20 минут при 2000 оборотов.

Если сыворотка прозрачная, то повторного центрифугирования не надо. Обычно объем сыворотки при механическом отстаивании 1/3 от взятого объема крови; при центрифугировании – 3/4 объема крови.

Сыворотка отличается от плазмы отсутствием фибриногена (в плазме он есть, а в сыворотке нет), т.к. он переходит в тромб, превращаясь в фибрин.

Содержание электролитов правильнее определять в плазме крови.

Хранение. Обычно сыворотку крови держат в бытовом холодильнике при t 0…4 ⁰C. Можно замораживать и хранить в холодильнике без размораживания длительное время (для разных субстратов это время свое, например, активность щелочной фосфатазы при хранении в холодильнике увеличивается).

Биологический материал, взятый у одного пациента, называется образец. А часть образца для конкретного анализа – это проба.