Лабораторная работа № 3. Влияние ингибиторов на кинетику ферментативных реакций

Влияние ингибиторов на кинетику ферментативных реакций.

Задание для самостоятельной подготовки:

1. Знать типы ингибирования и соответствующие им уравнения скорости ферментативной реакции.

2. Уметь по графику в координатах Лайнуивера-Бэрка, Эди-Хофсти, Хейнса и Диксона определять тип ингибирования, константу ингибирования, кинетические параметры ферментативной системы.

Задание к работе.

Определить тип ингибирования и константу диссоциации комплекса фермент - ингибитор, исходя из данных таблицы.

1. Построить точечные графики в координатах Лайнуивера-Бэрка. На одной координатной плоскости расположить графики без и в присутствии ингибитора.

2. С помощью функций slope и intercept определить тангенсы угла наклона полученных прямых и отрезки, отсекаемые на оси ординат.

3. На графике Лайнуивера-Бэрка пострить прямые, проходящие через точки, и для определения типа ингибирования полученные прямые продлить до точки их пересечения, как это описано в Лабораторной работе 2.

4. По виду полученных графиков определите тип ингибирования.

5. По тангенсам угла наклона и отрезкам, отсекаемым на осях найти константу Михаэлиса, максимальную скорость реакции, константу диссоциации фермент-ингибиторного комплекса.

6. Построить графики и найти кинетические параметры методами Эди-Хофсти, Хейнса и Диксона. Сравнить полученные результаты.