Возбудитель кампилобактериоза

Выделено и описано восемь видов кампилобактеров (греч.campilos – изогнутый, bakterion – палочка), но патогенными для животных и человека являются лишь три.

Кампилобактериоз – инфекционная болезнь крупного рогатого скота, овец, свиней, могут поражаться и куры. У млекопитающих отмечают аборты, временное бесплодие, задержание последа, вагиниты, метриты, рождение нежизнеспособного молодняка; у кур – снижение прироста массы бройлеров, яйценоскости кур-несушек и падеж цыплят. Эта болезнь регистрируется во всех странах мира.

Кампилобактеры отнесены к семейству Spirillaceae и выделены в род Сampylobacter. Основные виды данного рода: C.fetus, C.jejuni и С.coli.

Морфология. Кампилобактеры – полиморфные, тонкие, изогнутые палочки в виде запятой, летящей чайки, буквы V, спирали с одним или несколькими завитками, длиной 0,5-8 и толщиной 0,2-0,8 мкм. В старых культурах могут встречаться бактерии сферической или кокковидной формы. Подвижны, имеют один полярный жгутик (до 15 мкм), реже – по одному на каждом конце клетки; движение винтообразное. Капсул и спор не образуют.

Грамотрицательные, спиртоводные растворы анилиновых красителей воспринимают с трудом, в связи, с чем кампилобактеры окрашивают карболовым фуксином Циля разведенным 1:5.

Культивирование. Хемоорганотрофы, микроаэрофилы или анаэробы. Оптимум роста C.fetus отмечается при концентрации атмосферного кислорода 5-6% и температуре 37⁰С; элективное значение рН 7,0-7,2.

Для получения культур возбудителя кампилобактериоза используют полужидкий 0,15-0,25%-ный мясо-печеночный пептонный агар (ПЖА), 2-3%-ный мясо-печеночный пептонный агар (МППА), приготовленные на основе экстракта мышцы сердца крупного рогатого скота, сафранино-железо-новобиоциновую среду (СЖН). Культуры также выращивают на агаре Мартена и среде Китта-Тароцци без масла.

На 2-7 сут на ПЖА около поверхности среды появляется рост виде серого диска толщиной от 1 до 4 мм; на плотной среде кампилобактеры образуют нежный налет или отдельные голубоватые мельчайшие колонии; на СНЖ при росте чистой культуры розовый цвет среды не изменяется, при размножении других видов микробов среда становится ярко-желтой.

Биохимические свойства. Кампилобактеры не ферментируют углеводы и мочевину, дезаминируют глутаминовую и аспарагиновую кислоты, оксидазоположительны, индол не выделяют. Образуют сероводород, за исключением подвида C.fetus venerealis. Желатин не разжижают, молоко не свертывают, не вызывают гемолиза на средах с кровью. Реакции с метиловым красным и Фогеса-Проскауэра отрицательны. Подвиды C.fetus синтезируют каталазу и не редуцируют нитраты.

Устойчивость. В сене, подстилке, навозе, почве, воде кампилобактеры остаются жизнеспособными при температуре 13-27⁰С до 20 дн., при 6⁰С – до 1 мес.; в гниющем материале разрушаются быстро. К замораживанию устойчивы, высушивание их убивает за 3 ч, при 55⁰С - гибнут через 10 мин.

Растворы едких щелочей, хлорной извести, свежегашеной извести в концентрациях, применяемых для дезинфекции, убивают их за 5-10 мин.

Патогенность. В естественных условиях кампилобактериозом болеют крупный рогатый скот и овцы, реже козы. Основной возбудитель кампилобактериоза крупного рогатого скота – подвид венералис, овец – фетус. От крупного рогатого скота также выделяют подвид фетус, кампилобактер еюни и сапрофитный подвид бубулюс. Описаны случаи диареи у коров, овец, коз, свиней и собак, вызванные кампилобактером еюни. Заболевание свиней могут обусловить подвиды венералис и мукозалис. Для кур патогенен кампилобактер еюни.

К экспериментальному заражению культурой кампилобактеров восприимчивы только беременные животные: овцы, козы, морские свинки, хомячки. Материал им вводят подкожно, внутрибрюшинно, интравагинально или орально.

Кампилобактериальные гастроэнтериты выявляются повсеместно. У человека процесс вызывает кампилобактер еюни и протекает как острое желудочно-кишечное заболевание (энтероколит), имеются сообщения о выделении подвидов венералис и фетус. Установлено, что патогенность кампилобактера еюни связана с продукцией термолабильного энтеротоксина. Источники инфекции – животные, от которых возбудители могут попадать в организм человека при употреблении сильно обсемененных продуктов. Важная роль принадлежит диким водоплавающим птицам, способным загрязнять источники водопользования.

Лабораторная диагностика. В лабораторию направляют абортированный плод с оболочками, желудок, печень; от коров – слизь шейки матки; от быков – препуциальную слизь, сперму. В медицинской практике лабораторная диагностика кампилобактериоза у человека основана на выделении возбудителя из содержимого кишечника.

Лабораторные методы диагностики кампилобактериоза включают микроскопию, получение культур, идентификацию выделенных сероваров и серологические исследования.

Иммунитет и средства специфической профилактики. Переболевшие кампилобактериозом животные приобретают прочный иммунитет, у них повторные аборты не отмечаются. Иммунитет гуморальный: в сыворотке крови выявляются специфические антитела. Не исключается клеточно-зависимый иммунитет, обусловленный Т-лимфоцитами.

Для активной профилактики применяют эмульсинвакцину против кампилобактериоза овец. Иммунитет у привитых животных наступает через 10-15 дней после вакцинации и сохраняется не менее 12 мес.

Туши и другие продукты убоя, полученные от больных животных, направляют на изготовление вареных колбас и консервов или на проварку. Пораженные органы и ткани направляют на утилизацию.

Возбудитель лептоспироза.

Лептоспиры вызывают лептоспироз – инфекционную природно-очаговую болезнь животных и человека, характеризующуюся кратковременной лихорадкой, анемией, желтухой, гемоглобулинурией, геморрагическим диатезом, некрозом слизистых оболочек и кожи, атонией органов пищеварения, абортами. Болезнь может протекать бессимптомно. Возбудителя открыли Инад и Идо в 1914-1915 гг.

Лептоспиры относятся к семейству Leptospiraceae (leptos- тонкий, speira - виток, спираль) и роду Leptospira, который включает два вида: патогенный - L.interrogans и сапрофитический – L.вiflexa. Патогенный вид представлен 183 сероварами, которые по составу антигенов объединены в 25 серогрупп.

В инфекционной патологии животных наибольшее значение имеют серогруппы: Pomona, Tarassovi, Hebdomadis, Grippotyphosa, Icterohaemorragiae, Canicola.

Морфология. Лептоспиры – спиралевидные бактерии диаметром 0,1-0,25 и длиной 6-15-30 мкм, образующие около 20 мелких, тесно расположенных первичных завитков и 1-2 вторичных, придающих клетке форму букв Г, S, С. Осевая нить состоит из двух фибрилл. В темном поле они имеют вид тонких, серебристых нитей с утолщенными и загнутыми в виде крючков концами. У клеток некоторых штаммов концы прямые (бескрючковые лептоспиры).

Для лептоспир характерна активная подвижность. Главный тип движения – вращательно-поступательный. Спор не образуют. Грамотрицательны, плохо окрашиваются анилиновыми красителями, по Романовскому-Гимзе – в красный цвет, но фиксация резко изменяет их морфологию; используют также метод импрегнации серебром по Левадити.

Культивирование. Лептоспиры – хемоорганотрофные факультативно-анаэробные бактерии. Культивируют их в аэробных условиях при температуре 28-30⁰С на специальных средах, содержащих 5-10% сыворотки крови кролика или овцы, дистиллированную, водопроводную воду или фосфатный буфер (рН 7,2-7,6). К ним относятся среды: Уленгута, Терских, Ферворта-Вольфа, Любашенко и др. Размножение лептоспир обычно начинается через 7-20 дн., иногда 1-2 мес. Среда при этом не изменяется и наличие роста определяют микроскопией в темном поле. На плотных средах (Кокса, ВГНКИ) образует колонии S-, O- и R-форм. S-форма колоний – типичная для вирулентных штаммов, ее колонии прозрачные, в виде диска с ровным краем.

Биохимические свойства. Изучены недостаточно. Ферментация углеводов не доказана; обнаружены каталаза, оксидаза, липаза и др.

Устойчивость. В воде открытых водоемов патогенные лептоспиры сохраняются от 7 до 30 дней и более; будучи типичными гидрофилами, в почве, перенасыщенной водой, выживают до 280 дней, в свежем молоке – 8-24 ч; в замороженном мясе погибают через 10 дней. Чувствительны к воздействию поваренной соли; в засоленном (4,8% NaCl) мясе крупного рогатого скота погибают через 10 дней; в гипертоническом растворе поваренной соли (2,8%) – через 15 мин.

При кипячении погибают моментально, при 56-58⁰С – в течение 25-30 мин. Быстро гибнут при высушивании и под воздействием прямого солнечного света. 0,1%-ный раствор соляной кислоты, 0,5%-ный раствор фенола - инактивируют лептоспиры за 20 мин.

Патогенность. К лептоспирозу наиболее восприимчивы крупный рогатый скот (серогруппы помона и гебдомадис), свиньи (серогруппы помона и тарассови), лисицы, песцы, менее – лошади, козы, овцы, буйволы, верблюды, олени, ослы, собаки, кошки, куры. Лептоспирозом болеет и человек. Основными носителями лептоспир в природных очагах являются серые и водяные полевки, серые крысы, домовые мыши, землеройки.

К экспериментальному заражению наиболее чувствительны золотистые хомячки, крольчата-сосуны и молодые морские свинки.

Лабораторная диагностика. Материалом для исследования служат: кровь (лучше брать на 3-5-й день болезни при повышенной температуре тела), моча, кусочки паренхиматозных органов, почка, мочевой пузырь с содержимым, абортированный плод. Патологический материал отбирается не позже 2 часов после гибели животного. Моча собирается при естественном мочеиспускании и в летнее время исследуется в течение 3 ч.

М и к р о с к о п и я. Исследуют мочу, цитратную кровь, тканевую суспензию. Микроскопию проводят в раздавленной капле с конденсором «темного поля». Типичные лептоспиры подвижны и имеют форму прямой или S-образно изогнутой серебристо-белой нити с загнутыми в виде крючков концами. Лептоспиры также можно обнаружить в срезах из органов после импрегнации серебром по методу Левадити.

Выделение культур. Материал засевают по 1-3 капли одновременно в 3-5 пробирок со специальной питательной средой и инкубируют при температуре 28-30⁰С в течение 3 мес. Лептоспиры начинают размножаться через 7-20 дней, иногда 1-2 и очень редко – 3 мес. Наличие роста контролируют темнопольной микроскопией раздавленных капель, которые готовят через каждые 5 дней из всех пробирок. При обнаружении размножения лептоспир делают пересев в 3-5 пробирок со свежей средой. Получить культуры лептоспир удается не всегда.

Б и о л о г и ч е с к а я п р о б а. Метод более эффективный, чем бактериологический; проводится с целью выделения и очистки культур лептоспир, определения вирулентности и дифференциации от сапрофитов.

С е р о л о г и ч е с к о е и с с л е д о в а н и е. Для серологической диагностики лептоспироза используют РМА (реакция микроагглютинации) и реакцию агглютинации (РА). Пробы крови берут на 5-7-й день болезни и при исследовании отдельных животных повторно через 7-10 дней. Необходимо помнить, что антитела в крови у выздоровевших животных могут сохраняться до двух и более лет.

Иммунитет и средства специфической профилактики. После переболевания у животных формируется длительный и напряженный иммунитет.

Для активной иммунизации применяют депонированную поливалентную вакцину ВГНКИ против лептоспироза животных.

Для пассивной иммунизации и лечения больных животных используют гипериммунную сыворотку против лептоспироза.

Обеззараживание условно годного мяса. При отсутствии дистрофических изменений и желтушности, мясные туши и внутренние органы направляют на проварку или перерабатывают на мясные хлеба. Измененные внутренние органы и кишечник утилизируют или уничтожают. Шкуру дезинфицируют

Молоко больных животных обезвреживают кипячением и используют в корм животным в хозяйстве.

Больных лептоспирозом животных убивают на санитарной бойне с соблюдением мер личной профилактики. Послеубойную дезинфекцию помещения и инвентаря проводят 2-3%-ным раствором хлорной извести или формальдегидом.