Возбудители - бактерии из рода Sаlmоnella-палочки, подвижные кроме S. рullоrum и S. gаllinагum), грамотрицательны, растут в анаэробних и аэробных условиях.
Идентификация сальмонелл основана на особенностях антигеннои структуры.
У сальмонелл насчитывают 64 соматических О-антигена, 67 жгутиковых Н-антигенов первой фазы и 20 - второй фазы, чтопоз-волило выявить у них свыше 60 серогрупп и балее 1300 серотипов. Целью бактериологического исследования является устсавление антигенной формулы выделенной сальмонеллы. Менее четко различаются сальманеллы по биохимическим признакам. Они не расщепляют лактазу и сахаразу, ферментируют глюкозу, маннит (кроме S. tuphlmurium) арабинозу (кроме S. chaleraesuis), дульцит (кроме S. dublen, S. еntеritidis,. S. mascow, S. rostock), образуют сероводород (кроме S. Chalera suis и S. typhlsuis) и не образуют индол. Из множества сальманелл в нашеи стране зарегистриравано около 45 серотипов, принадлежащих к серогруппам А, В, C1, С2, D1 И F1, что облегчает лабораторную диагностику сальмонеллезав.
Среди животных наиболее распространены:.
|
|
у крупного рогатога скота - S. tурhimurium, S. dublin.;
у свиней - S. choleraesuis, S. typhisuis, S. tурhimurium, S. dublin, S. mаuсhеn;
у овец - S. abartus ovis, S. typhimurium;
у лошадей - S. abortus equi;
у куриных - S. pullorum, S.gallinarum; у водоплавающих - S. tурhimurium S. anatum,
S. lаndоn;
у пушных зверей - S. typhimurium, S. choleralsuis, S. dublin.
Формы заболевания. Различают три формы сальмонеллезов: первичные, или паратифы, возбудителями которых являются определенны сальмонеллы (паратифы телят, поросят, паратифозные аборты лошадеи и овец), вторичные сальмонеллезы, ослажняющие течение оснавнои инфекции, например чумы свиней, пастереллеза и др.;
бактерионосительство у внешне здоровых животных, когда сальмонеллы выделяются только с фекалиями или обнаруживаются в печени, желчном пузыре, печеночных и брыжеечных лимфоузлах.
Материал для исследования: свежие трупы мелких животных и птиц или паренхиматозные органы с регионарными лимфоузлами и трубчатая кость; абортированные плоды истечение из матки при аборте; кровь 5-10 мл; фекалии (при невозможнос;и посева в течение 3-4 ч пробу фекалий в пробирке консервируют тройным объемом 30%-ного водного раствора глицерина или 0,15 мл фосфатной буферной смеси, рН 8,0).
Посевы. Патологический материал высевают в МПБ, на косой агар и в чашки с двумя средами: Плоскирева и Левина (Эндо или висмут-сульфитным агаром). Из печени, селезенки и лимфоузлов делают многократные отпечатки свежими срезами органа; для каждой чашки вырезают новый кусочек. Соскобы со стенки желчного пузыря или са среза трубчатой кости суспендируют в пробирке внебольшом абъеме физиологического раствора и по 2-3 капли взвеси рассевают шпателем по поверхнасти среды. Кровь высевают, как и взвесь.
|
|
Одновременно из тех же органов готовят несколько камплектов тонких: мазков-отпечаткав. После фиксирования один комплект окрашивают по Граму, а другой - комплексной флуоресцирующей сальмонеллезной сывороткой и проводят микроскопию.
При обнаружении контурного свечения бактерий на + + и выше устанавливают их принадлежность к той или иной группе. С этой целью окрашивают остальные комплекты препаратов, испальзуя раздельно, и прежде всего те О-сыворотки, которые сооветствуют сальмонеллам, наиболее часто выделяемым, у животных данного вида.
При сомнительнам или отрицательном результате люминесцентнай микроскопии из глубины всех органов вырезают кусочки размерам 2Х2Х4 см и в закрытых чашках инкубируют 4-6 ч при 370С для накопления сальмонелл, после чего иммунолюминесцентное исследование повторяют.
Положительный результат первичный или повторной люминесцентной микраскапии дает права на постановку окончательного диагноза.
Высевы инкубируют при 370С до 3 суток и просматривают через 18-24 ч (48-72 ч). На плотных дифференциально-диагоастических средах сальмонеллы образуют круглые и гладкие, иногда шероховатые колонии, неокрашенные или слегка розоватые на средах Эндо и Плоскирева, со слабым фиолетавым оттенкаом на среде Левина или черные с металическим блеском на висмут-сульфитном ага ре.
Несколько наиболее типичных изолированных колоний проверяют в пластинчатой РА с поливалентной сальмонеллезной О-сывороткаой, а мазки из них окрашивают по Граму и комплексной флуоресцирующей сальманеллезной сываороткой и микроскопируют. При паоложительных результатах микроскопии и РА оставшуюся бактерийную массу колоний отсевают в МПБ и на МПА для дальнейшего исследавания.
Из палученной чистой культуры делают высевы в полужидкий агар для определения подвижности, в среды Андредэ с глюкозой, лактозой, сахарозой, маннитом, дульцитом, арабинозой, в МПБ на образавание индола и сероводородо и на МПА.
Одновременно проводят дальнейшую идентификацию культуры в пластинчатой РА с монорецепторными О-сыворотками, входящими в поливалентную. Определив серогруппу сальмонеллы, уточняют ее серотип в реакции с соответствующими Н-сыворотками первой фазы, а потом - второй. Для агглютинации с О-сыворотками культуру берут из верхней части косяка, а для Н-сыворотку конденсата: здесь жгутики у сальманелл наибалее выражены.
Если выделенный штамм сералагически типирован и обладает соответствующими культурально-биохимическими признаками, диагноз считают устанавленным и культуру испытывают на антибиотикоустойчивость (см. Определение чувствительнасти микробов к антибиотикам).