Качественное обнаружение

Хроматографическое разделение. 2 аликвоты (1,5 и 2/5 части экстракта (V ₂) выпаривают под током теплого воздуха или на роторном испарителе. Остатки преносят с помощью хлороформа на стартовую линию хроматографической пластинки в виде двух полос длинной 1 и 3-4 см на расстоянии 1,5 см друг от друга. На ту же стартовую линию наносят метчик, состоящий из смеси 0,1 % спиртовых растворов бензофенонов производных 1,4 бенздиазепина (МХБ-диазепам, АНБ-нитрозепам, АБХБ-фенозепам, АХБ-хлордиазепоксид) в количестве 10-15 мкг каждого. Подвижная фаза- бензол. Пробег фронта растворителя -10см. Органический растворитель удаляют с хроматограммы под током теплого воздуха в течение 3-5 минут. При концентрации бензофенонов в пятне более 5 мкг их можно обнаружить по собственной желтой окраске. Часть хроматограммы, содержащею 2/5 экстракта, предназначенную для элюирования, закрывают стеклянной пластинкой. На открытой части хроматограммы с пятном метчика и второй полосой исследуемого экстракта (1/5 часть экстракта) проводят реакцию образования азокрасителя. С этой целью хроматографическую пластинку обрабатывают последовательно 2н раствором соляной кислоты, 0,1% раствором нитрита натрия и через 5 минут 0,5% раствором сульфамата аммония или насыщенным раствором мочевины, далее 0,1% раствором b-нафтола в 10 % растворе едкого натра или N- l- нафтилэтилендиаминдихлорида. Величины Rf бензофенонов приведены в таблице №1. Чувствительность 1 мкг препарата в пятне (при использовании N- l- нафтилэтилендиаминдихлорида 2 мкг в пятне)

Необработанную реагентом зону сорбента, содержащею бензофеноны вырезают и проводят элюирование используя этиловый спирт (V₃). Далее снимают спектр в диапазоне волн 200-500нм в кювете с толщиной поглощающего слоя 7 см.

Таблица 2. Значение величин Rf и λ max продуктов гидролиза производных 1,4 бенздиазепина.