ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ №2
Тема: Строение и химический состав бактериальной клетки. L-формы бактерий, возбудителей заболеваний человека. Тинкториальные свойства бактерий, окраска по методу Грама и другие сложные методы окраски.
Цель: Изучить строение клеточной стенки микроорганизмов. Освоить сложные методы окраски для выявления отдельных органоидов бактериальной клетки.
Знать:
· Строение клеточной стенки бактерий. Химический состав и функциональное назначение.
· Особенности строения и химического состава клеточной стенки у грамположительных и грамотрицательных бактерий.
· L-формы бактерий. Особенности оболочки этих форм бактерий. Факторы, которые влияют на образование протопластов и сферопластов.
· Этапы окраски по Граму.
· Механизм дифференциальной окраски по Граму.
· Капсула и ее биологическая роль для бактериальной клетки. Химический состав капсулы.
· Внутриклеточные включения. Биологическая роль в жизнедеятельности бактерий. Методы выявления.
|
|
· Биологическое значение спор и условия их образования.
· Чем обусловлена термоустойчивость спор?
· Функция и строение жгутиков бактерий. Методы их выявления.
Уметь:
· Уметь проводить дифференциацию бактерий по тинкториальным свойствам.
· Владеть техникой контрастирования капсул у бактерий по Бурри-Гинсу.
· Овладеть техникой изготовления мазка из агаровых культур бактерий.
· Приготовить препарат и окрасить его с целью выявления спор в культуре микроорганизмов.
· Уметь окрасить препарат для дифференциальной окраски по Граму.
· Выявить наличие жгутиков в культуре с помощью метода Леффлера.
Контрольные вопросы:
· Какие компоненты составляют оболочку бактерий, какой из них определяет тинкториальные свойства бактерий?
· Каковы методики окраски микроорганизмов сложными методами окраски?
· В чем сущность окраски по Граму?
· Как контролируется правильность окраски по Граму?
· Кислотоустойчивые бактерии. Особенности химического состава клеточной стенки.
· Споры у бактерий. Их биологическое значение и условия образования.
· Методы выявления кислотоустойчивых бактерий и спор.
· Морфология микоплазм. Особенности ультраструктуры.
· Функция и строение жгутиков бактерий. Методы их выявления.
Краски, применяемые в микробиологической практике
Для окрашивания микроорганизмов используют анилиновые красители (основные, кислые и нейтральные). Микроорганизмы лучше окрашиваются основными красками. Для окраски препаратов готовят спиртовые, водно-спиртовые и водные растворы. В некоторых случаях добавляют в качестве протравы карболовую кислоту, щелочь и др. Наиболее часто употребляемыми красителями являются следующие:
|
|
синие - метиловый синий, водный синий, опаловый синий;
красные - фуксин основной, конго красный, сафранин, нейтральный красный, фуксин кислый;
фиолетовые - метиловый фиолетовый, кристаллический фиолетовый, генцианвиолет;
зеленые - малахитовый зеленый, бриллиантовый зеленый, светло-зеленый;
желто-коричневые - хризоилин, везувин.