Реакция окисления тиамина в тиохром

Принцип реакции: витамин В₁ в щелочной среде под действием гексоцианоферрата (III) калия (K₃Fe(CN)₆) окисляется в тиохром – пигмент жёлтого цвета, который в изобутиловом спирте даёт интенсивно синюю флюоресценцию:

Тиамин

Тиохром

Материалы и реактивы: тиамин в концентрации 5 мкг в 1 см³, 30%-ный раствор гидроксида натрия (NaOH), 1%-ный раствор K₃Fe(CN)₆, изобутиловый спирт.

Оборудование: источник ультрафиолетового излучения (флюороскоп), штатив с пробирками, пипетки.

Порядок проведения работы: к 1 см³ раствора витамина В₁ (исследуемого вещества) прибавляют 2 см³ смеси (1 см³ раствора K₃Fe(CN)₆ и 1 см³ раствора NaOH), тщательно перемешивают и оставляют на три минуты. Затем прибавляют 5 см³ изобутилового спирта, энергично и равномерно встряхивают в течение 2 мин. Изобутиловый экстракт тиохрома в ультрафиолетовых лучах имеет интенсивную синюю флюоресценцию.

4.2.1.2 Реакция восстановления витамина В₂(рибофлавина)

Принцип реакции: образующийся при добавлении металлического цинка к концентрированной соляной кислоте водород восстанавливает жёлтый рибофлавин сначала в родофлавин (промежуточное соединение) красного цвета, а затем в бесцветный лейкофлавин.

Окисленная форма	Восстановленная форма

Материалы и реактивы: концентрированная соляная кислота (НСl), металлический цинк, 0,025%-ный раствор витамина В₂ (взвесь рибофлавина в воде).

Оборудование: пробирки, пипетки.

Порядок выполнения работы: в пробирку приливают 1 см³ раствора витамина В₂, 0,5 см³ концентрированной соляной кислоты и опускают кусочек металлического цинка. Выделяющийся водород реагирует с рибофлавином, восстанавливая его, и жидкость постепенно окрашивается в розовый цвет, а затем обесцвечивается. При взбалтывании обесцвеченного раствора лейкофлавин вновь окисляется кислородом воздуха в рибофлавин.

Наблюдают постепенное окрашивание жидкости в розовый цвет и её дальнейшее обесцвечивание.

4.2.1.3 Реакция на витамин РР (антипеллагрический, В₅)

(ниацин)

Принцип реакции: при нагревании витамина РР с раствором ацетата меди образуется плохо растворимый синий осадок медной соли витамина РР.

Витамин РР

Медная соль витамина РР

Материалы и реактивы: витамин РР в порошке, 10%-ный раствор уксусной кислоты, 5%-ный раствор ацетата меди.

Оборудование: пробирки, пипетки.

Порядок выполнения работы: в пробирку помещают 5…10 мг витамина РР и растворяют при нагревании в 1…2 см³ раствора уксусной кислоты. К нагретому до кипения раствору прибавляют такой же объём раствора ацетата меди. Жидкость становится мутной, окрашивается в голубой цвет, а при стоянии выпадает синий осадок медной соли никотиновой кислоты.

Наблюдают окрашивание испытуемой жидкости в голубой цвет, образование осадка синего цвета.

4.2.1.4 Реакция на пиридоксин (витамин В₆)

Принцип реакции: при взаимодействии пиридоксина с раствором хлорида железа (FeCl₃) жидкость окрашивается в красный цвет вследствие образования комплексной соли типа фенолята железа.

Материалы и реактивы: водный раствор (1%-ный) витамина В₆, 1%-ный раствор хлорида железа (FeCl₃).

Оборудование: пробирки, пипетки.

Порядок выполнения работы: в пробирке смешивают 1 см³ водного раствора пиридоксина и 2 капли раствора хлорида железа. Смесь встряхивают. Наблюдают окрашивание жидкости в красный цвет.

4.2.1.5 Реакции на витамин Р(рутин)(цитрин, витамин

проницаемости)

Реакция рутина с хлоридом железа (III)

Принцип реакции: хлорид железа (III) образует с рутином комплексные соединения, окрашенные в изумрудно-зеленый цвет.

Материалы и реактивы: рутин (порошок и насыщенный водный раствор), 1%-ный раствор хлорида железа (III) (FeCl₃), концентрированная серная кислота, 0,5%-ный раствор соляной кислоты, 10%-ный раствор гидроксида натрия, реактив Фелинга.

Оборудование: штатив с пробирками, пипетки.

Порядок выполнения работы: к 2 см³ насыщенного водного раствора рутина прибавляют несколько капель раствора FeCl₃.

Наблюдают появление зелёного окрашивания.

Реакция рутина с концентрированной серной кислотой

Принцип реакции: концентрированная серная кислота образует с флавонами и флавонолами флавилиевые соли, растворы которых имеют ярко-жёлтую окраску.

Порядок выполнения работы: к 2 см³ насыщенного водного раствора рутина осторожно по стенке пробирки доливают 1 см³ концентрированной серной кислоты.

На границе двух жидкостей наблюдают возникновение кольца, окрашенного в жёлтый цвет.

4.2.1.6 Реакции на витамин С(аскорбиновая кислота)

Принцип реакции: аскорбиновая кислота способна легко вступать в окислительно-восстановительные реакции.

Аскорбиновая кислота способна легко восстанавливать гексоцианоферрат-(III) калия (K₃Fe(CN)₆). При этом K₃Fe(CN)₆ восстанавливается до K₄Fe(CN)₆, который с ионами валентного железа даёт соль Fe₄[Fe(CN)₆]₃ синего или зелёного цвета.

Порядок выполнения работы: к 1 см³ раствора аскорбиновой кислоты прибавляют 1 см³ раствора K₃Fe(CN)₆ и 0,5 см³ раствора хлорида железа (III) (FeCl₃).

Наблюдают образование сине-зелёного окрашивания.