Тонкие мазки окрашивают по методике Н.Г. Алексеева

12 13 14 15 16 17 18

Срочное окрашивание по Н.Г. Алексееву

Окрашивание мазков по Лейшману Красители

Ход окрашивания

Буферный раствор

Окрашивание по Паппенгейму (модификация) Красители

Схема окрашивания мазков по методу Паппенгейма Состав фиксатора Мая-Грюнвальда

Схема окрашивания по методу Романовского-Гимзы

Состав красителя

Окрашивание по Гимзе

Используют специальный стандартный раствор Гимзы.

• Азур I - 3,772 г.

• Эозин - 2,165 г.

• Метиленовый синий - 1,563 г.

• Метанол (чистый) - 750,0 мл.

• Глицерин (чистый) - 256,0 мл. Ход окрашивания

1. Препарат давностью от 6 ч до 2-3 дней фиксируют в метаноле в течение 3 мин.

2. Опускают на 30 мин в красящую жидкость (5 мл стандартного раствора Гимзы и 20 мл дистиллированной воды с pH 6,8-7,2).

3. Споласкивают водопроводной водой, высушивают на воздухе.

Сухие мазки фиксируют в метиловом спирте или смеси Никифорова 5 и 15 мин соответственно. Затем погружают в рабочий раствор (в разведении 1:4) готовой краски Романовского-Гимзы на 5-7 мин. После этого промывают дистиллированной водой и высушивают.

• Порошок Мая-Грюнвальда - 250 мг.

• Метиловый спирт - 100 мл.

Раствор подогревают при 70 °С на водяной бане до полного растворения порошка, фильтруют и хранят в бутылке с притертой пробкой.

Перед окраской предварительной фиксации мазков не требуется. На подсохшие на воздухе мазки наливают краску - фиксатор Мая- Грюнвальда - на 3 мин. Не сливая краски, к ней добавляют такое же количество дистиллированной воды. Через минуту краску с мазка сливают и, не ополаскивая мазка, наливают рабочий раствор готовой краски Романовского-Гимзы (1 мл краски плюс 4 мл дистиллированной воды с pH 6,8) на 5 мин. Готовую краску Романовского-Гимзы перед приготовлением рабочего раствора фильтруют. После окраски препараты промывают дистиллированной водой и высушивают на воздухе, установив вертикально в специально изготовленной сушке.

1. Мая-Грювальда 0,3%.

300 мг порошка краски Май-Грювальда растворяют в 100 мл метилового спирта. Раствор созревает 3 дня.

2. Азур II.

1,0 г порошка растворяют в 1000 мл кипящей воды.

3. Эозин К или Na.

Для приготовления эозина К берут 1,0 г порошка и растворяют в 1000 мл кипящей воды. Для получения эозина Na берут 0,5 г порошка на то же количество воды.

1. Однозамещенный фосфорнокислый К или Na. 1,7 г соли на 100 мл дистиллированной воды.

2. Двузамещенный фосфорнокислый К или Na. 1,7 г соли на 100 мл дистиллированной воды.

Растворы можно хранить в холодильнике. Для получения воды с pH 6,8-7,2 необходимо смешать одну часть 1-го и две части 2-го раствора (10 мл 1-го раствора и 20 мл 2-го раствора на 1 л дистиллированной воды).

1. Фиксруют мазки (высушенные) в метаноле 3 мин.

2. Окрашивают в течение 10 мин в растворе состава: 1 часть красителя Мая-Грюнвальда 0,3% на 4 части дистиллированной воды (pH 6,8-7,2).

3. Докрашивают азур-эозином в течение 20 мин:

• раствор азура - 1 часть;

• раствор эозина - 1 часть;

• дистиллированная вода (pH 6,8-7,2) - 5 частей.

4. Смывают краску проточной водой.

5. Высушивают мазки на воздухе.

1. Краска Лейшмана.

2,5 г сухой краски Лейшмана на 1 л метилового спирта. Краска созревает 3-4 дня.

2. Азур.

1 г сухой краски азур на 1 л дистиллированной воды. Краска созревает 3-4 нед.