Тема №1. Введение в биохимический практикум

Ответ к задаче №1

         Движение к аноду – глутамат; к катоду – лизин, аргинин, гистидин; остаются на старте – аланин, глицин.

Ответ к задаче №2

Трипептид состоит из метионина, триптофана и треонина.

ИЭТ находится в слабокислой среде, так как мет и три имеют неполярные радикалы, тре – полярный незаряженный.

Ответ к задаче №3

    Пример ответа для группы А.

а) при рН=5 высаливанием осаждаем Б₃, отделяем цитрифугированием.

б) при рН = 7 соль добавляем медленно, вначале выпадает более тяжелый Б₂, его нужно отцентрифугировать, затем при большей концентрации соли выпадает более легкий Б₁. Б₄ остается в растворе.

Ответ к задаче №4

    Фибрин образует сгусток при рН крови, равной 7,4, то есть он лишен заряда, а значит, находится в изоэлектрической точке. Этим можно объяснить и снижение растворимости белков при отщеплении от них пептидов.

Ответ к задаче №5

    32100 г/моль.

Ответ к задаче №6

    При кипячении молока казеин всегда денатурирует, но выпадает в осадок тогда, когда лишен заряда, а это происходит в кислом молоке. Следовательно, ИЭТ казеина находится в кислой среде.

Ответ к задаче №7

     При рН 3,0 суммарный заряд данного олигопептида (+); при рН 5,0 – (0); при рН 11,0 – (-);

ИЭТ пептида лежит в области рН = 5,0.

 

ТЕМА №2. ФЕРМЕНТЫ

Ответ к задаче №1

    Может.

Ответ к задаче №2

         Ферменты являются белками, а трипсин действует на пептидные связи, что приводит к инактивации ферментов.

Ответ к задаче №3

    Конкурентный ингибитор, так как он связывается в активном центре фермента и его действие  снижается при увеличении концентрации субстрата.

Ответ к задаче №4

    Инфаркт миокарда. АСТ является внутриклеточным ферментом и его активность в крови повышается при разрушении клеток.

Ответ к задаче №5

    По принципу положительной обратной связи происходит активация начального фермента продуктом реакции.

Ответ к задаче №6

    Лекарственные препараты трасилол и гордокс ингибируют активацию трипсина в самой поджелудочной железе.

Ответ к задаче №7

    Протеолитические ферменты и дезоксирибонуклеазы действуют на денатурированные белки, расщепляют их, тем самым очищают раны.

Ответ к задаче №8

    а – оксидоредуктазы; б – лиазы; в – гидролазы; г – трансферазы.

Ответ к задаче №9

    1 – аллостерический; 2- химическая модификация; 3 – ограниченный протеолиз; 4 – белок-белок взаимодействие.

Ответ к задаче №10

    После диссоциации каталитические субъединицы высвобождаются из-под влияния ингибитора, активность возрастает.

Ответ к задаче №11

    Пептидазы свертывающей системы крови действуют лишь на 1-2 строго определенных белка. Пищеварительные пептидазы действуют на любые белки, содержащие определенные пептидные связи. Таким образом, специфичность пептидаз свертывающей системы крови выше.

Ответ к задаче №12  

    Ингибиторы пептидаз не применяют при понижении свертываемости крови, так как при этом ингибируются ферменты, участвующие в свертывании крови, и это приводит к увеличению кровоточивости.

Ответ к задаче №13

    в, д.

Ответ к задаче №14

    При тепловой обработке инактивируется фермент, превращающий глюкозу в крахмал.

Ответ к задаче №15

    Различия в заряде, связанном со свободной ОН-группой в фосфате. Общий заряд АТФ = - 3, цАМФ – 0, важна и конфигурация молекул, поэтому не происходит конкуренции за центры связывания.

Ответ к задаче №16

    Ингибитор 1 – конкурентный, влияние ингибитора уменьшается с ростом концентрации субстрата.

Ингибитор 2 – неконкурентный, субстрат не влияет на действие ингибитора.

Ответ к задаче №17

    Необходимо определить общую активность кислых фосфатаз в отсутствии и в присутствии тартрат-ионов. Затем определить разницу, она и будет определять активность фермента из простаты.

Ответ к задаче №18

    Хлорофос является необратимым ингибитором ацетилхолинэстеразы, выводит фермент из строя.

Ответ к задаче №19

    Аденилатциклаза – лиаза; фосфодиэстераза – гидролаза; протеинкиназа - трансфераза; протеинфосфатаза - гидролаза.

Ответ к задаче №20

    Глюкокиназа работает в печени, гексокиназа - в мышцах. Они являются изоферментами с разным сродством к глюкозе. У гексокиназы оно выше, и поэтому она работает при низких концентрациях глюкозы.

 

 

ТЕМА №3. БИОЛОГИЧЕСКОЕ ОКИСЛЕНИЕ

 

Ответ к задаче №1

    Изоцитратдегидрогеназа, 2-оксоглутаратдегидрогеназа, малатдегидрогеназа, так как они являются НАД+-зависимыми.

Ответ к задаче №2

    Метка находится в альфа-положении (2) оксалоацетата.

Ответ к задаче №3

         Интенсивность работы цикла Кребса снизится, так как восстановленный НАД является ингибитором изоцитратдегидрогеназы - ключевого фермента цикла Кребса.

Ответ к задаче №4

5 Пируват → 5 Ацетил-КоА → СО₂ + Н₂О + 75АТФ. В присутствии ротенона синтезируется 15АТФ. В присутствии 2,4- динитрофенола (полное разобщение) – 5 АТФ (только за счет субстратного фосфорилирования).

Ответ к задаче №5

     В 1-ом случае синтезируется 6 молекул АТФ;во 2-ом - 7 молекул АТФ; в 3-ем - 5 АТФ.

Ответ к задаче №6

     Более мощным ядом будет антимицин, так как он блокирует поступление водорода на участке от убихинола, а значит водород не поступает не только от ФАД-зависимых дегидрогеназ, но и от НАДН-дегидрогеназы.

Ответ к задаче №7

   Потребление кислорода снизится, так как блокируется убихинолдегидрогеназа.

Ответ к задаче №8

     Разобщители повышают потребление кислорода и скорость переноса электронов по дыхательной цепи, но разобщают окисление и фосфорилирование. В результате образование АТФ резко снижается, что может вызвать смерть.

Ответ к задаче №9

   Для аккумуляции энергии у данных организмов используется субстратное фосфорилирование.

Ответ к задаче №10

    Олигомицин блокирует протонную АТФ-синтетазу, поэтому синтеза АТФ не происходит.

Ответ к задаче №11

    После того, как метиленовая синь переводит часть гемоглобина в метгемоглобин, цианиды получают возможность связываться не с цитохромом а₃ клеток, а с метгемоглобином в эритроцитах, который содержит необходимое для связывания трехвалентное железо.

Ответ к задаче №12

    Скорость поглощения кислорода митохондриями увеличится, так как АДФ является активатором работы дыхательной цепи.

Ответ к задаче №13

    Сначала скорость поглощения кислорода увеличится, а со временем снизится, так как АДФ в ходе реакции превращается в АТФ.

Ответ к задаче №14

    Малонат является конкурентным ингибитором сукцинатдегидрогеназы, поэтому работа цикла Кребса затормозится. Восстановленные коферменты не поступают в дыхательную цепь, и потребление кислорода снижается.

Ответ к задаче №15

    Коэффициент фосфорилирования (Р/О) для малата равен 3, так как малатдегидрогеназа является НАД-зависимым ферментом.

Ответ к задаче №16

    Коэффициент фосфорилирования (Р/О) для сукцината равен 2, так как сукцинатдегидрогеназа является ФАД-зависимым ферментом.

Ответ к задаче №17

    Коэффициент фосфорилирования (Р/О) будет меньше 3, так как амитал является блокатором дыхательной цепи. Перенос электронов с изоцитрата будет заблокирован.

Ответ к задаче №18

         Бурый жир выполняет термогенную функцию, что особенно важно для новорожденных, так как у них не сформирована система терморегуляции. Бурый цвет ткани обусловлен большим количеством цитохромов.