Учет численности микроорганизмов почвы

Для учета численности микроорганизмов в почве применяют широко распространенный метод питательных пластин (метод Коха). Он позволяет учесть количество живых клеток в почве и выявить родовой и видовой состав, выделить чистые культуры бактерий. Но потребность в питательных веществах у различных микроорганизмов неодинакова, поэтому суспензию почвы высевают на разные среды (плотные и жидкие), предназначенные для различных физиологических групп микроорганизмов.

При посеве почвенной суспензии на жидкие питательные среды методом предельного разведения, численность микроорганизмов бывает несколько занижена.

Приготовление почвенной суспензии и посев на питательные среды.

Для проведения общего микробиологического анализа почвы, необходимо сделать посев микроорганизмов на плотные (МПА, КАА) и жидкие среды (среда Гильтая, среда Виноградского)

мясо – пептонный агар (МПА) – учитывают количество сапрофитных микроорганизмов, использующие в качестве источника углерода органические соединения.

крахмало – аммиачный агар (КАА) – выявляют микроорганизмы, способные использовать минеральные формы азота.

среда Гильтая – используют для выявления денитрифицирующих бактерий.

среда Виноградского – применяется для определения анаэробных азотофиксаторов (Clostridium pasterianum).

Также используют метод обрастания комочков для выявления численности определенных групп микроорганизмов:

— для выявления аэробных целлюлозоразлагающих микроорганизмов раскладывание комочков производится на среде Гетченсона.

— для выявления аэробных азотофиксаторов (в т.ч. Azotobacter) – на среде Эшби.

Приготовление почвенной суспензии: 10г почвы помещают в колбу емкостью 250 мл с 90 мл стерильной водопроводной воды, интенсивно взбалтывают вращательным движением (не смачивая пробки) 10 мин. Затем методом разведения готовят суспензии, содержащие разное количество почвы: из предыдущего разведения стерильной пипеткой переносят 1 мл суспензии в пробирку, содержащую 9 мл воды. В первой пробирке 1 мл суспензии, приготовленной по этому методу, соответствует разведению 10^-1.

Из полученных разведений делают посев на жидкие и плотные питательные среды.

Если численность отдельных групп микроорганизмов в почве небольшая, их выявляют методом обрастания комочков почвы.

Результаты опыта. Учет численности микроорганизмов различных групп.