Опишите биотехнологию производства иммунологических препаратов №3

Иммунобиологические лекарственные препараты (ИЛП) — лекарственные препараты биологического происхождения, предназначенные для иммунологической диагностики, профилактики и лечения различных заболеваний. Введение ИЛП в организм человека приводит к развитию искусственно приобретенного активного (вакцины, анатоксины) или пассивного (иммуноглобулины человека нормальные и специфические, в том числе, гипериммунные плазмы, гетерологичные иммуноглобулины и сыворотки и моноклональные антитела) иммунитета. К ИЛП относятся и другие лекарственные препараты биологической природы (бактериофаги, пробиотики, цитокины, включая интерфероны, аллергены и аллергоиды, ферменты микробов), а также лекарственные препараты, произведенные путем биотехнологических процессов, в том числе, с применением методов генетической инженерии.

При получении конечного продукта, будь то вакцина, профилактический бактериофаг или диагностикум, необходимо выполнение схемы производственного процесса, состоящего из нескольких основных стадий.

1) Первая стадия заключается в выборе производственного штамма клеток, который должен быть генетически стабильным и высоко продуктивным.
2) Вторая стадия – это подбор питательной среды для культивирования производственного штамма клеток. Основные требования к среде – адекватность и простота.
3) Третья стадия – культивирование клеток-продуцентов, при этом могут быть использованы традиционные консервативные методы и автоматически управляемые процессы крупномасштабного культивирования с применением биореакторов типа хемо- или турбостатов.
4) Последняя, четвёртая, стадия состоит в выделении целевого конечного продукта, его очистки и концентрации, контроле, превращении в товарную форму.

               Качество ИЛП обеспечивается следующими основными условиями:

1) в производстве используют только изученные, генетически стабильные производственные штаммы микробов
2) используют адекватные питательные среды, обладающие высокими ростовыми свойствами;
3) используют культуры клеток, в соответствии с рекомендациями ВОЗ, депонированные в официальных коллекциях и разрешенные к использованию для производства (при культивировании клеток не допускается использование нативной сыворотки крови человека, а также антибиотиков группы пенициллина!);
4) животные и птицы, используемые для производства ИЛП, получают только из хозяйств, благополучных в отношении бактериальных, вирусных, прионных и др.болезней, опасных для человека;
5) при производстве ИЛП из плазмы и клеток крови и органов человека должны соблюдаться требования, предъявляемые к состоянию здоровья донора;

Некоторые испытания, являющиеся критическими стадиями/точками в технологии производства, должны быть определены на промежуточных этапах производства. Например, к таким испытаниям относится определение герметизации и наличия вакуума.

Получение живых вакцин: культивирование ​ вакцинного штамма в производственных условиях (бактерийные штаммы культивируют на питательных средах, вирусные — на куриных эмбрионах или в культурах клеток); очистка ​ вакцинного штамма от балластных веществ (питательной среды, культуры клеток и т. д.; стандартизация ​ (определение активности, доведение до рабочей концентрации, расфасовка в ампулы); ​ лиофилизация​ со стабилизатором (альбумин, сахароза с желатиной); контроль: ​ концентрации живых бактерий или вирусов вакцинного штамма, остаточной влажности, ​безвредности, аллергенности, иммуногенности и др.

Получение убитых вакциН: культивирование​ вакцинного штамма; инактивация (чаще 0, 4 % формальдегидом при 37— 40 ОС в течение 4 нед); очистка​ от балластных компонентов; добавление адъюванта; стандартизация​; лиофилизация; контроль​: остаточной вирулентности, содержание бактерий или вирусов вакцинного штамма, остаточной влажности, стерильности, безвредности, аллергенности, иммуногенности и др. n n
получение пробиотиков В ДРУГОМ ВОПРОСЕ

БАКТЕРИОФАГИ ​ получают путём культивирования пораженных бактериофагом бактерий на питательных средах с выделением из культуральной жидкости фильтрата, содержащего фаги. Активность препарата определяют путём титрования на чувствительных к нему культурах бактерий.

Для диагностики и лечения аллергических заболеваний из экзогенных А. готовят препараты, которые также получили название «аллергены».

Общий принцип их приготовления:
Из сложных по составу продуктов готовят водно-солевые экстракты. Экстрагирующей жидкостью обычно служит раствор хлористого натрия, стабилизированный фосфатным буфером с рН = 7,0 — 7,2 с добавлением 0,4% раствора фенола. А. из простых хим. веществ готовят, разводя их в различных растворителях. Полученные экстракты освобождают от взвешенных частиц фильтрованием или центрифугированием. Далее фильтрат или надосадочную жидкость стерилизуют фильтрованием через фильтр Зейтца. Полученный таким образом фильтрат (аллерген) проверяют на стерильность, безвредность и специфичность. Для проверки на стерильность вносят по 0,5 ​ мл экстракта на различные питательные среды и следят за посевами 8 дней. Стерильный экстракт разливают в инсулиновые флаконы и снова проверяют его на стерильность. Следующий этап — проверка на безвредность, для чего экстракт вводят белым мышам. Если мыши остаются живыми в течение 4 дней, А. считается безвредным.

Специфичность проверяют на здоровых и чувствительных к данному А. людях. У здоровых лиц А. должен давать отрицательную кожную пробу, а у больных — положительную