Биопроба. Проводят на овцах, иммунных к вирусной лихорадке овец, так как вирус может помешать интерпретации результатов. Заражение осуществляют внутривенно. Инкубационный период составляет около 11 дней. Животных убивают через 2-4 дня после появления лихорадки и исследуют на наличие возбудителя. При доставке в лабораторию мышей, инокулированных в полевых условиях, их убивают через 4-21 день, селезенку растирают в бульоне и вводят внутривенно овцам. Биопробу можно проводить на мышах с учетом результата по сероконверсии.
Выделение и идентификация культуры возбудителя. Возбудитель удается культивировать в перевиваемой линии клеток эндотелия сосудов теленка, где его выявляют микроскопически, в РИФ и ПЦР.
Бактериологическое исследование
Лабораторная диагностика инфекционного гидроперикардита животных
Трансмиссивная, остро протекающая инфекционная болезнь, преимущественно крупного рогатого скота, овец и коз, характеризуется септицемией и лихорадкой, нервными явлениями и скоплением экссудата в полости тела и сердечной сорочке. Распространена в Центральной, Восточной и Южной Африке. Передается через иксодовых клещей рода Аblуоmа, в организме которых сохраняется до 3 лет. Возбудитель — Cowdria ruminantum, род Cowdria (вид перенесен в род Ehrlichia, семейство Rickettsiaceae). Лабораторная диагностика основывается на результатах бактериоскопического исследования мазков из материала и данных биопробы.
|
|
Прижизненно для постановки биопробы берут стерильно и дефибринируют кровь через 2-4 дня после начала лихорадки. Возбудитель отличается низкой устойчивостью, выживает при комнатной температуре не более пяти часов, при -70° С — до двух лет. Одним из вариантов сохранения возбудителя до постановки биопробы является введение интраперитонеально материала мышам, в организме которых возбудитель сохраняется достаточно долго (30 суток) без признаков заболевания мышей. Посмертно объектом исследования являются крупные сосуды (аорта, яремная вена), в эндотелии которых наиболее часто обнаруживается возбудитель, а также серое вещество головного мозга, почки, в капиллярах которых также присутствуют риккетсии. Возбудитель может быть обнаружен у клещей.
Микроскопическое исследование исходного материала. Из нескольких мест интимы яремной вены, аорты делают соскобы, готовят мазки. Также готовят гистосрезы из почек, коры мозга (аммоновых рогов). Рекомендуется готовить мазки — отпечатки из кусочков ткани мозга путем раздавливания между предметными стеклами. У клещей исследуют эпителий кишечника. Препараты фиксируют метанолом, окрашивают по Романовскому-Гимза. Возбудитель локализуется в вакуолях цитоплазмы клеток эндотелия, имеет коккоидную (0,3 мкм), палочковидную (0,3 х 0,5 мкм) или диплококковую форму, цвет клеток от синего до пурпурного. Для выявления возбудителя используют РИФ и ПЦР.
Серологическая диагностика из-за малой специфичности (ЭЛИЗА) малоэффективна.