Работа 24. Определение жизнеспособности пыльцы по B.C. Шардакову

Метод основан на выявлении пероксидазы, которая с реактивом, содержащим бензидин, дает в присутствии перекиси водорода ярко-розовое, либо темно-красное окрашивание. Таким методом можно выявлять жизнеспособную пыльцу. Погибшая пыльца такого окрашивания не дает, поскольку данный фермент (пероксидаза) у них разрушается. Однако, как отмечает ряд авторов, данный метод дает несколько завышенные результаты особенно при исследовании долго хранившейся пыльцы.

ХОД РАБОТЫ

Непосредственно перед анализом готовят четыре свежих раствора, которые хранят в темной посуде.

1. В 100 мл 50%-ного этилового спирта растворяют 200 мг бензидина основного.

2. В 100 мл 50%-ного этилового спирта растворяют 150 мг

ά-нафтола.

3. В 100 мл дистиллированной воды растворяют 250 мг углекислого натрия.

4. В капельнице подготавливают свежий 0,3%-ный раствор перекиси водорода.

Первые три раствора смешивают в разных объемах и наливают в капельницу. Анализируемую пыльцу помещают на предметное стекло. Капают вышеуказанную смесь трех растворов, размешивают и добавляют каплю перекиси водорода.

Жизнеспособная пыльца дает окрашивание через 3-4 минуты. Подсчитывают % жизнеспособности пыльцы в нескольких полях зрения.

МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ

1) пыльца пшеницы, томатов и др.; 2) бензидин основной; 3) ά-нафтол; 4) Na₂CO₃; 5) перекись водорода; 6) микроскоп; 7) предметные и покровные стекла.

Работа 25. Выведение почек из состояния покоя

Покоящиеся почки находятся на зимующих растениях и отдельных зимующих органах. Сигналом к прекращению глубокого покоя служит в большинстве случаев низкие температуры. Холод, скорее всего, индуцирует локальную активацию генов.

Другими факторами, выводящими растений из состояния покоя, могут служить тепло, пары эфира, этиленхлоргидрин.

ХОД РАБОТЫ

Веточки сирени, черемухи, ивы, березы или других растений помещаем в воду с 36-40⁰С на 12 часов. Другие веточки помещаем в контейнер с парами диэтилового эфира, III вариант обработать инъекцией спирта, IV вариант обработать этиленхлоргидрином. Можно использовать вариант с обработкой ауксином и гиббереллином. Контрольный вариант обрабатывают водой. Затем выдерживают растения в нормальных условиях. Следят за распусканием почек. Делают выводы.

МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ

1) однолетние ветки древесных растений; 2) серный эфир; 3) этиленхлоргидрин; 4) термостат; 5) водяная баня.