Техника определения групп крови человека системы АВО с помощью Цоликлонов

Определение производится в нативной крови, взятой в консервант; в крови, взятой без консерванта; в крови, взятой из пальца. Используется метод прямой гем-агглютинации на плоскости: на пластине или планшете. Определение группы крови производится в помещении с хорошим освещением при температуре 15-25°С.

3.1. Нанесите на планшет или пластину индивиду­альными пипетками Цоликлоны Анти-А, Анти-В и Анти-АВ по одной большой капле (0,1 мл) под соответствующими надписями.

3.2. Рядом с каплями антител нанесите по одной маленькой капле исследуемой крови (0,01-0,03 мл).

3.3. Смешайте кровь с реагентом.

3.4. Наблюдайте за ходом реакции с Цоликлонами визуально при легком покачивании пластины или планшета в течение 3 минут. Агглютинация эритроци­тов с Цоликлонами обычно наступает в первые 3-5 сек, но наблюдение следует вести 3 мин ввиду более позднего появления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А или В.

3.5. Результат реакции в каждой капле может быть положительным или отрицательным. Положительный результат выражается в агглютинации (склеивании) эритроцитов. Агтлютинаты видны невооруженным глазом в виде мелких красных агрегатов, быстро сливающихся в крупные хлопья. При отрицательной реакции капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агтлютинаты в ней не обнаруживаются.

3.6. Интерпретация результатов реакции агглюти­нации исследуемой крови с Цоликлонами представлены в таблице.

* Знаком плюс (+) обозначено наличие агглютинации, знаком минус (-) - отсутствие агглютинации.

** Окончательно АВО принадлежность устанавливается по результатам перекрестного определения: антигенов А и В на эритроцитах и изогемагглютининов в сыворотке.

Контроль специфичности реакции агглютинации

В составе Цоликлонов нет высокомолекулярных до­бавок, способных вызвать неспецифическую поли­агглютинацию эритроцитов, поэтому не требуется проведения контроля с растворителем. При поло­жительном результате реакции агглютинации со все­ми тремя Цоликлонами необходимо исключить спонтанную неспецифическую агглютинацию иссле­дуемых эритроцитов. Для этого смешайте на плос­кости 1 каплю исследуемой крови (эритроцитов) с каплей физиологического раствора. Кровь можно отнести к группе AB(IV) только при отсутствии аг­глютинации эритроцитов в физиологическом растворе.