Материалом для исследования является отделяемое язвы – мягкого шанкра.
Микроскопический метод заключается в исследовании препаратов из отделяемого мягкого шанкра, окрашенных по Граму и метиленовым синим. Возбудитель мягкого шанкра (Haemophilus ducreyi) выглядит в виде длинных цепочек грамотрицательных палочек.
Бактериоскопический метод осуществляют путем посева материала на кровяные питательные среды, на которых Haemophilus ducreyi через 48-72 часа образует мелкие круглые колонии, окруженные зоной гемолиза. Идентификацию выделенной культуры проводят на основании изучения биохимических (посев на среды «пестрого» ряда) и антигенных (постановка РА на стекле) свойств.