Реакция взаимодействия антиген-антитело. Реакция агглютинации

Сущность реакции заключается во взаимодействии антител-агглютинов и антигена-агглютиногена, в результате которого образуется комплекс АГ+АТ, выпадающий в осадок-агглютинат.

Готовят сыворотку, разводят стандартный антиген физ раствором 1:10 и ставят реакцию. В 4-х пробирках делают разведения Ат –0,5мл 1:50,1:100,1:200, 1:400, и приливают в каждую по 0,5мл АГ 1:10. Пробирки встряхивают и ставят в термостат на 16-20 часов, потом в течении часа при комнатной t. Учет микроскопически.

Оценка реакции

++++ полное осветление, зонтик

+++ жидкость слегка опалесцирует, зонтик

++ жидкость мутная, зонтик слабо выраж.- реакция «+»

+ жидкость мутная, осадок в виде точки - реакция «-»

Можно ставит РА пластинчатым (капельным) методом.

«+» - первые 5 мин видны крупинки и хлопья минего цвета, жидкость просветляется.

«-» - смесь гомогенна.

Реакция связ-ния комплемента

Сущность РСК в том, что если в сыворотке, полученной от больного животного, есть АТ, то они со специфическими АГ могут образовать комплекс, связывая комплемент, и гемолиза не будет, реакя «+»

Компоненты:

1. Сыворотки – исследуемая, позитивная и нормальная – в разведении 1:5 или 1:10, инактивные.

2. Антиген в разведении согласно титру.

3. Гемолизин (гемолитическая сыворотка).

4. Комплемент.

5. Эритроциты барана.

6. Физиологический раствор.

Этапы постановки РСК:

1.разведение и титрование гемолизина

2.титрование комплемента в гем. и бакт. системе.

3.проведение основной реакции.

Главный опыт РСК