З а д а н и е №1

Выявить наличие спор в фиксированном препарате из 3-х суточной культуры спорообразующих бактерий Bacillus anthracoides (окраска по Ожешко). Препарат микроскопировать с объективом 90´ и иммерсией. Обратить внимание на расположение спор, характер их окраски, диаметр спор по отношению к диаметру бактериальной клетки. Определить форму и расположение клеток. Препарат зарисовать, внести методику окраски по Ожешко в протокол.

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

Окраска по Ожешко

1. Приготовить толстый и равномерный мазок, без скоплений клеток на краю стекла.

2. Нанести на мазок несколько капель 0,5%-ного раствора соляной кислоты и подогреть 1-2 мин над пламенем горелки до закипания.

3. Слить кислоту, препарат промыть водой.

4. Высушить мазок на воздухе.

5. Зафиксировать жаром.

6. Окрасить мазок карболовым фуксином Циля с подогреванием до появления паров, но не доводя краситель до кипения, красить 3-5 мин.

7. Слить краситель и промывать препарат водой.

8. Погрузить препарат на 3-5 с в 5%-ный раствор серной кислоты.

9. Обильно промыть препарат водой.

10. Докрасить препарат метиленовым синим Леффлера в течение 3-5 мин.

11. Высушить препарат на воздухе.

З а д а н и е №2

Выявить наличие капсулы в фиксированном препарате из суточной культуры капсульных бактерий Klebsiella pneumoniaе (окраска по Бурри-Гинсу). Препарат микроскопировать с объективом 90´ и иммерсией. Обратить внимание на бесцветную капсулу бактериальных клеток (определить морфологию). Препарат зарисовать, внести методику окраски по Бурри-Гинсу в протокол.

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

Окраска по Бурри-Гинсу

1. На предметное стекло налить каплю разведенной (1:9) черной туши.

2. Поместить в каплю туши исследуемую суспензию бактерий и перемешать.

3. Нанести на мазок каплю смеси Никифорова на 2-3 мин (фиксация).

4. Промыть препарат водой.

5. Окрасить фуксином Циля, разведенным 1:3, в течение 3-5 мин.

6. Промыть препарат водой и высушить

7. Докрасить препарат метиленовым синим Леффлера в течение 3-5 мин.

8. Высушить препарат на воздухе.

З а д а н и е №3

Выявить наличие внутриклеточных включений (зерна волютина) в фиксированном препарате из суточной культуры возбудителя дифтерии – Corynebacterium diphtheriae (окраска по Леффлеру). Препарат микроскопировать с объективом 90´ и иммерсией. Определить форму и взаимное расположение бактерий, количество зерен волютина. Препарат зарисовать, внести методику окраски по Леффлеру в протокол.