Возбудители лептоспироза

Среда Терских модифицированная. 1/15 М растворы двузамещенного фосфа­та натрия (Na2HP04·2H20) и однозамещенного фосфата калия смешивают в соотношении 72: 28 и проверяют рН. Если он ниже 7,2, то в смесь добавляют понемногу первый раствор, а если выше 7.3, добавляют второй раствор. Уста­новив рН 7,2-7,3, смесь разводят 1: 10 свежей дистиллированной водой, раз­ливают в пробирки по 5 мл и стерилизуют при 1 ати 30 мин. Пробирки С проз­рачным раствором отбирают, выборочно проверяют в них рН и в каждую до­бавляют стерильно по 7-8 капель кроличьей сыворотки, прогретой при 56 ос в течение 30 мин.

Среда Уленгута. Водопроводную воду, рН 7,2-7,3, стерилизуют текучим па­ром по 1 ч 3 дня подряд. К 10 объемным частям воды прибавляют 1 часть сте­рильной сыворотки крови лошади или кролика, смешивают, разливают асептически в пробирки по 3 мл и заливают 1 мл стерильного жидкого пара­фина.

Среда Любашенко. Нехлорированную водопроводную, колодезную или реч­ную воду фильтруют через бумагу и стерилизуют при 1 ати 30 мин. По охлаж­дении устанавливают рН 7,3-7,4 и добавляют 5% сыворотки кролика или ба­рана, прогретой при 56⁰С 1 ч. Среду фильтруют через пластинки «СФ». В приборе Зейтца при небольшом вакууме (660 мл ртутного столба) и асептически разливают в пробирки. Для проверки на стерильность пробирки выдерживают при 37⁰С 48 ч.

Водно-сывороточная cpедa. Воду (водопроводную, колодезную, речную или дистиллированную) проверяют потенциометрические и устанавливают с по­мощью фосфатных буферных растворов рН 7,0-7,3. Разливают в пробирки по 5 мл и стерилизуют при 1 ати 30 мин. По охлаждении добавляют по 0,5 мл свежей кроличьей сыворотки, прогретой в водяной бане при 56-58⁰ С 30 мин.

Среда Ферворта - Вольффа в модификации Тарасова. Состав пептон 1 г, 1/15 М фосфатная буферная смесь, рН 7,2, 100 мл (ее готовят как и для среды Терских), хлорид натрия 0,5 г, вода дистиллированная 900 мл. Навески пептона и хлорида натрия растворяют при подогревании в 100--200 мл воды, добавля­ют буферную смесь и доводят водой до 1 л. Среду в колбе стерилизуют при 1 ати 30 мин. На другой день ее дважды пропускают через два слоя фильтро­вальной бумаги, разливают в пробирки по 5 мл и стерилизуют при том же ре­жиме. После охлаждения пробирки с помутневшей средой или с осадком вы­браковывают. В остальные добавляют стерильно по 0,5 мл кроличьей сыворотки и прогревают их в водяной бане при 56-58⁰С 30 мин для инактивирования комплемента.

Полужидкая среда Флетчера. К 1 л дистиллированной воды добавляют 2 г промытого агар-агара (лучше агара Дифко) и кипятят 30 мин при помешива­нии. Охлаждают до 60⁰С и устанавливают рН 7,3-7,4. Разливают в пробирки по 5 мл и стерилизуют при 0,8 ати 30 мин. После охлаждения добавляют по 0,5 мл стерильной кроличьей или овечьей сыворотки и прогревают в водяной бане при 56-58⁰С 30 мин. Для проверки стерильности пробирки выдерживают в термостате при 37⁰С 3-5 суток.