Постановка РПГА при скрининге сывороток крови

Сыворотки крови для скринингового исследования разводят в лунках планшета следующим образом:

· предварительные разведения 1:20 готовят в лунках планшета, внося в них сначала 190 мкл раствора РИП, добавляя затем по 10 мкл исследуемых сывороток и перемешивая пипетированием (при этом цвет раствора в лунках после добавления сывороток должен измениться с сине-фиолетового на зеленый);

· скрининговые разведения 1:40 готовят в других лунках, внося в них сначала по 25 мкл раствора ФБР, добавляя затем по 25 мкл предварительно разведенных сывороток и перемешивая пипетированием.

При каждой постановке РПГА необходимо проводить контрольное определение титра К+. Для этого в 8 лунок вносят по 50 мкл раствора ФБР. Затем в первую лунку вносят 50 мкл рабочего раствора К+, перемешивают пипетированием и переносят в следующие лунки по 50 мкл, получая 2-кратные разведения от 1:20 до 1:2560. Еще в 4 лунки вносят по 50 мкл раствора ФБР для контроля СЭД на отсутствие спонтанной гемагглютинации.

Далее в лунки со скрининговыми разведениями исследуемой сыворотки и контролями вносят по 25 мкл СЭД. Суспензию СЭД во флаконе или ванночке перед использованием перемешать! После внесения СЭД содержимое лунок перемешивают постукиванием о край планшета. Планшет выдерживают при комнатной температуре в течение 30 - 40 минут.