Учет результатов при скрининге сывороток крови

Учет результатов проводят по условной шкале четырех крестов:

++++ (4+) - эритроциты образуют на дне лунки перевернутый "зонтик", края его опадают;
+++ (3+) - эритроциты образуют на дне лунки перевернутый "зонтик", края его ровные;
++ (2+) - эритроциты образуют на дне лунки тонкое кольцо;
+ (1+) - эритроциты образуют на дне лунки плотное кольцо или диск;
(-) - эритроциты образуют на дне лунки точку.

Положительным результатом считают агглютинацию нагруженных Vi-антигеном эритроцитов не менее, чем на 3 креста (+++).

Контролем качества диагностикума служат 4 лунки контрольного ряда, в которые вносили только раствор ФБР и СЭД. В этих лунках не должно быть спонтанной агглютинации (-). В противном случае следует повторить исследование с диагностикумом другой серии.

Сыворотки с отрицательным результатом следует считать не содержащими антител к Vi-антигену в диагностическом титре 1:40.

Сыворотки, дающие положительный результат в разведении 1:40, следует исследовать повторно в варианте с раститровкой сыворотки для установления ее титра.

Результаты можно считать достоверными только в том случае, если титр прилагаемой контрольной сыворотки (К+) не ниже, чем 1/2 титра, указанного на этикетке.

Постановка РПГА при раститровке сывороток крови

Раститровку исследуемых сывороток и рабочего раствора К+ проводят в коротких рядах планшета. Еще один короткий ряд используют для контроля на отсутствие спонтанной гемагглютинации СЭД.

В первую лунку ряда для раститровки исследуемой сыворотки вносят 180 мкл раствора РИП. Во все остальные лунки вносят по 50 мкл раствора ФБР.

В лунки ряда для контроля диагностикума на отсутствие спонтанной агглютинации вносят по 50 мкл раствора ФБР.

В лунки с раствором РИП вносят 20 мкл исследуемых сывороток. Каждую сыворотку вносят своим наконечником и перемешивают раствор в лунке трехкратным пипетированием. При этом цвет раствора в лунках должен измениться с сине-фиолетового на зеленый.

В первую лунку ряда для раститровки К+ вносят 100 мкл рабочего раствора К+, в остальные лунки вносят по 50 мкл раствора ФБР. Затем из первых лунок рядов для исследуемых сывороток и контрольной сыворотки переносят по 50 мкл в следующие лунки рядов, получая 2-кратные разведения от 1:20 до 1:1280.

Во все лунки кроме первых лунок каждого ряда вносят по 25 мкл СЭД. Суспензию СЭД во флаконе или ванночке перед использованием перемешать! После внесения СЭД содержимое лунок перемешивают постукиванием о край планшета. Планшет выдерживают при комнатной температуре в течение 30 - 40 минут.