Клостридий

При определении присутствия (отсутствия) сульфитредуцирующих клостридий в определенной навеске продукта или его эквивалентном разведении эту навеску или разведение вносят в одну из вязких питательных сред, указанных выше.

*Посевы инкубируют при (37±1)°С не более 72 ч. Посевы на чашках Петри инкубируют в анаэробных условиях. Ежедневно посевы просматривают для обнаружения признаков роста сульфитредуцирующих микроорганизмов – почернения сульфитной среды.

Из посевов в вязкие среды отбирают пробирки с признаками роста – отдельными черными колониями или полностью почерневшей питательной средой на глубине свыше 1 см. Из отобранных пробирок проводят пересевы петлей в чашки Петри на поверхность одной из агаризованных сред, указанных выше так, чтобы получить рост изолированных колоний. Посевы инкубируют в анаэробных условиях при (37±1)°С в течение 24-48 ч.

Из посевов на агаризованные среды отбирают чашки, на которых выросло от 15 до 150 характерных колоний.

Не менее 5 отобранных овальных черных или окруженных черным или серым ореолом колоний диаметром 4-5 мм высевают раздельно в свежерегенерированную среду Китт-Тароцци. Для регенерации перед употреблением пробирки со средой помещают в водяную баню и прогревают (20±1) мин при температуре (100±1) ⁰С. Затем их охлаждают водопроводной водой.

Посевы инкубируют при (37±1)°С не более 48 ч.

Подтверждение принадлежности выделенных сульфитредуцирующих микроорганизмов к роду Clostridium

Микроскопирование

Из выросших культур (овальные черные или окруженные черным или серым ореолом колонии диаметром 4-5 мм) готовят два препарата и окрашивают первый — по Граму, второй — для выявления бактериальных спор.

Сульфитредуцирующие клостридии представляют собой грамположительные палочки, располагающиеся в одиночку, попарно, в виде цепочек или скоплений параллельных клеток. При спорообразовании споры сульфитредуцирующих клостридий овальные или сферические, субтерминальные или терминальные.

Определение отсутствия каталазы

Отсутствие каталазы в выросших культурах определяют по ГОСТ 10444.3.

Сульфитредуцирующие клостридии каталазу не образуют.