Иммобилизованных ферментов

Определяемое соединение Фермент Метод иммобилизации Пределы определяемых концентраций, М
АТФ Арилаза Ковалентная сшивка 10-3 – 8×10-3
Глюкоза Глюкозооксидаза Сшивка бифункциональным реагентом 1,5×10-7 – 10-6
Глюкоза Глюкозооксидаза Ковалентная сшивка 3×10-5 – 5×10-4
Глюкоза Гексокиназа Ковалентная сшивка 1,4×10-3 – 2,5×10-2
Мочевая кислота Урикиназа Ковалентная сшивка 10-3 – 4×10-3
Мочевина Уреаза Ковалентная сшивка 2×10-5 – 2×10-1
Пенициллин Пенициллиназа Ковалентная сшивка 10-2 – 10-1
Холестерин Холестерин- оксидаза Ковалентная сшивка 3×10-5 – 10-4

В подавляющем большинстве энтальпиметрические биосенсоры представляют собой устройства в виде мини-реакторов.

В основе определения ингибиторов термометрическим методом лежит способность некоторых веществ инактивировать ферменты. Аналитическим узлом такого биосенсора – анализатора ионов тяжелых металлов – является мини-колонка с иммобилизованным ферментом (например, уреазой). Ингибированные ферменты определяются следующим образом: проба 0,5 М мочевины прокачивается в течение 30 с через реактор, затем вводится проба ингибитора, а через 30 с – 0,5 М мочевины. Степень ингибирования равна относительной теплоте, выделяемой после введения ионов. Уреаза регенерируется путем пропускания через реактор раствора йодида натрия и ЭДТА в течение 3 мин. Ионы йода следующим образом восстанавливают ферментативную активность:

E–Hg + 2I- ® E + HgI2

HgI2 + 2I- ® HgI42-,

где E–Hg – инактивированный ионами ртути фермент E. Стабильность комплекса HgI42 настолько высока,что ферментативная активность регенерируется полностью после многократного отравления биокатализатора.

Аналитическая система позволяет определять ионы тяжелых металлов в концентрациях 40—300мкМ. Анализатор имеет ряд преимуществ перед атомно-адсорбционной спектроскопией, главными из которых являются простота измерения и возможность непрерывного контроля концентрации тяжелых металлов в экологических системах.

Энтальпиметрические биосенсоры могут быть созданы на основе иммобилизованных антител (антигенов), меченных ферментами, катализирующими экзотермические реакции. Принципиальная схема таких устройств почти не отличается от энтальпиметрических систем, содержащих ферменты.

Термометрические микробные


Понравилась статья? Добавь ее в закладку (CTRL+D) и не забудь поделиться с друзьями:  



double arrow
Сейчас читают про: