2015-08-13
581
Продукты расщепления ДНК с помощью комплекса [Cu(phen)2]+ в присутствии Н2О2 были изучены с использованием 3'-5' [32Р] меченных фрагментов ДНК, разделяемых с помощью гель электрофореза. С помощью этих методов, Сигман с соавторами установили [47], что разрывы ДНК являются единственной причиной образования большого количества 3'-5' фосфомоноэстеразных концов, несколько меньшего количества 3'- фосфогликолатных концов и, метастабильного количества З'-промежуточных продуктов, стабильность которых варьирует (рис. 1.5.). Каких либо определенных последовательностей (пропеналей или др.), выщепляющихся при такой деградации пока не обнаружено. Эти результаты заметно отличаются от деградации ДНК с помощью блеомицина, при которой могут образовываться специфические пропеналевые последовательности вместе с фосфогликолатными окончаниями [48].
Рис. 1.5. Механизм расщепления ДНК бис -(1,10-фенантролинатом) меди (I) и пероксидом водорода
Эти результаты также не соответствуют механизму расщепления ДНК с помощью метидиумпропил-ЭДТА [49], изученному с помощью метода пульс радиолиза [50]. При всех типах деградации образуются ОН · -радикалы и отмечается одинаковое количество З'-фосфатных и З'-фосфогликолатных концов. Возможно, наиболее весомые аргументы в поддержку гипотезы взаимодействия комплекса 1,10-фенантролина с металлом через малую бороздку В-формы ДНК заключаются в том, что именно в ней локализуются два атома водорода, через которые идет взаимодействие. Сигман [37] и Уесуги с соавторами [51] предположили, что первичным объектом атаки НО · -радикала, являются атомы водорода, принадлежащий к С1 и С4 атомам рибозы.
Характер картин расщепления ДНК, полученных при обработке ДНК комплексом Сu(I)-1,10-фенантролин в присутствии Н2О2 и аскорбата натрия [52], свидетельствует о том, что расщепление ДНК в этой системе происходит, вероятно, не за счет возникновения гидроксильных радикалов, а за счет образования оксо-иона меди [53], т.е. возникновения иона Cu3+.
Итак, комплекс [Cu(phen)2]+ и подобные комплексы можно использовать как препараты разного назначения, действующие на уровне ДНК.
Глава 2.Экспериментальная часть
2.1. Спектрофотометрический метод
