Селекція соматичних гібридів

Селекцію соматичних гібридів здійснюють кількома методами.

При механічній ізоляції використовують морфологічно різні типи батьківських протопластів, після злиття продукти з’єднаних протопластів виявляють візуально під мікроскопом, ізолюють мікропіпеткою і культивують окремо. Наприклад при злитті протопластів тютюну і моркви як селективні маркери використовували зелені хлоропласти тютюну і червоно-оранжеві хромопласти моркви.

Другим методом, який дозволяє проводити відбір соматичних гібридів, є фізіологічна комплементація – спільна взаємодоповнююча дія різних генів. Протопласти двох видів тютюну N. glauca і N. langsdorfii утворювали клітинні стінки, але не могли ділитися і утворювати калюс на середовищі Нагата і Такебе. В той же час протопласти гібриду ділилися і утворювали калюс. Ще однією особливістю гібридного калюсу була здатність рости на середовищі без гормонів, що дало можливість створити цей метод селекції.

Існують також інші методи відбору соматичних гібридів. Наприклад: селекція за стійкістю до антибіотиків, гербіцидів, аналогів амінокислот і т.д.

Використання ізольованих протопластів не обмежується можливістю отримання соматичних гібридів. Ізольовані протопласти широко використовують у клітинній селекції та генетичній трансформації.

Контрольні запитання і завдання

1. Що таке ізольований протопласт?

2. Які існують методи виділення ізольованих протопластів?

3. Які фактори впливають на життєздатність ізольованих протопластів?

4. Чому у середовища для виділення та культивування ізольованих протопластів обов’язково додавати осмотичний стабілізатор?

5. Які речовини використовують при виділенні ізольованих протопластів як осмотичні стабілізатори?

6. Які ферменти використовують для виділення ізольованих протопластів?

7. Що обумовлює вибір складу ферментної суміші?

8. Із якого рослинного матеріалу можна виділяти ізольовані протопласти?

9. За яким методом проводять виділення ізольованих протопластів? Охарактеризуйте його.

10. Як щільність висіву ізольованих протопластів впливає на їхню життєздатність?

11. Що таке соматична гібридизація?

12. Які існують способи злиття ізольованих протопластів?

13. Які існують способи відбору та ідентифікації соматичних гібридів?

14. Які соматичні гібриди були одержані методом злиття ізольованих протопластів?