Быстро (в течение 1 рабочего дня)

Дешево.

Почти отсутствуют потери ТВ из-за многократной очистки вытяжки.

Недостатки:

Вода является не универсальным растворителем. Извлечение содержит большое количество балластных веществ, возможно образование эмульсии на этапе экстракции. Нельзя использовать с несвежим биоматериалом.

Метод Стаса-Отто 50,0-100,0 биоматериала измельчают и заливают абсолютным этанолом, подкисляя щавелевой или винно-каменной кислотой до рН=2-3. Перемешиваем и проверяем значение рН, настаиваем при комнатной температуре в течение суток при периодическом перемешивании и проверяем значение рН. Жидкую фазу сливаем, операцию повторяем 2-3 раза (в течение 2-3 суток), затем биоматериал помещаем на фильтр и промываем спиртом; спиртовые вытяжки объединяют и упаривают на водяной бане при 40-50°С до густоты сиропа. Сиропообразную жидкость обрабатывают этанолом до прекращения выпадения осадка, жидкость фильтруют, снова упаривают до густоты сиропа и вновь осаждают белки. Остаток обрабатывают 20-25 мл воды, осадок отфильтровывают, проводят экстракцию хлороформа (203 порции), получают кислое хлороформное извлечение. Водную фазу подщелачивают 25% раствором NH4OH до рН=9-10, извлекают хлороформом (2-3) порции, получают щелочное хлороформное извлечение.

Для подкисления используют органические кислоты для избежания гидролиза сложноэфирных, амидных и других связей.

Для подщелачивания берут только NH4OH т.к. при использовании NaOH будут образовываться феноляты, ХР в воде.

Достоинства метода:

Данный метод является общим, им можно извлечь большую группу ТВ.

Извлечение получается чистым, можно работать с несвежим биоматериалом.

Этанол является универсальным растворителем и извлекает большое количество ТВ.

Недостатки:

Метод чрезвычайно длительный (7-10 рабочих дней).

Большое количество осаждений молекул приводит к потере ТВ.