Стекла для препаратов нужно использовать новые, стандартного размера, чистые, обезжиренные и сухие

Обработка стекол для цитологического и цитохимического исследования

Техника приготовления мазков из материала, доставленного в лабораторию

Полученное количество материала не всегда определяет возможности диагностики, иногда очень малое количество материала является достаточным для постановки диагноза.

Присутствие большого количества крови часто является помехой. При ее наличии мазки необходимо делать как можно скорее, иначе наступает свертывание, и из свернувшегося сгустка очень трудно сделать мазки и провести исследование. Материал наносят на стекло и очень аккуратно делают мазки, так как клетки очень ранимы, а наличие большого числа разрушенных клеток мешает правильной диагностике.

Из жидких пунктатов мазки готовят подобно мазкам крови; если полученная масса плотная или комковатая, то помимо мазков можно приготовить и отпечатки на стекле. Метод отпечатков имеет определенные преимущества:

1) клетки подвергаются гораздо меньшему травматизму;

2) есть возможность расположения клеток пластами, что помогает при описании цитологического препарата характеризовать и соотношение клеток между собой.

3) если материал богат кровью, его необходимо нанести на стекло и тогда выбирать оттуда беленькие крупинки, из них делать мазки.

При использовании цитологического исследования во время операционного вмешательства, а также при получении биопсии этот метод может быть использован как самостоятельно, так и параллельно с гистологическим анализом. В этих случаях помимо пункций получают отпечатки с удаленных или обнаженных органов с помощью прикосновения предметного стекла к исследуемой ткани. Можно также готовить препараты при получении материала способом соскоба.

Жидкости, полученные при пункции, тут же центрифугируют, далее сливают верхний слой центрифугата, а из осадка делают мазки, которые и подвергают цитологическому исследованию. В некоторых случаях приготовленные препараты можно посмотреть под микроскопом, однако диагностику патологии необходимо проводить только по окрашенному препарату.

В настоящее время можно приобретать готовые стекла, предназначенные для приготовления цитологических мазков; если же для работы используются обычные лабораторные стекла, их для получения цитологического материала необходимо предварительно обработать.

1. Стекла тщательно промывают щеткой в теплой мыльной (или с моющим средством) воде.

2. Основательно промывают в теплой проточной воде.

3. Затем кипятят 1-2 ч в воде с добавлением соды (2-3%) или моющего средства.

4. Хорошо ополаскивают в чистой горячей воде и промывают в проточной (1-2 ч).

Обработанные и промытые в воде стекла протирают мягкой тряпкой, держа стекла за края, и хранят в смеси Никифорова (равные части 96° этилового спирта и эфира). По мере надобности пинцетом извлекают стекла из смеси Никифорова и протирают сухой тряпкой. Обработанные таким образом стекла могут быть использованы для приготовления цитологических препаратов.

Для проведения цитохимических исследований очень хорошие результаты дает обработка предметных стекол и других стеклянных предметов в смеси следующего состава:

• двухромовокислый калий - 100 г;

• вода горячая - 1000 мл;

• неочищенная серная кислота - 100 мл.

Для приготовления этой смеси растворяют в горячей воде двухро-мовокислый калий, затем охлаждают раствор и после этого добавляют серную кислоту. Кислоту льют осторожно (обязательно в вытяжном шкафу), при этом смесь весьма сильно нагревается и приобретает темно-коричневый цвет. В этом составе предметные стекла и другую

стеклянную посуду выдерживают 2-3 дня, а после промывают в проточной воде в течение 1-2 ч.

На хорошо обезжиренном предметном стекле вода должна растекаться тонким слоем, а не собираться в капли.

Для обеспечения надежной маркировки стекол желательно использовать стекла с матированным краем или штрих-коды. После окрашивания можно маркировать стекла, подписывая один край стекла тушью или несмываемым фломастером.