Бактериологического анализа

1 2 3 4 5 6 7

Система ВАСТЕС460 − радиометрический метод быстрого

определения роста МБТ (Mycobacterium tuberculosis) путем регистра-

ции уровня меченого СО2, образующегося в процессе утилизации

субстрата с пальмитиновой кислотой, содержащей радиоактивный

С14. Для роста МБТ в данной системе используют флаконы с жидкой

питательной средой, которая представляет собой обогащенную среду

Middlebrook 7H9, содержащую радиоактивный С14. При размноже-

нии МБТ утилизируют С14 и выделяют С1402; в этом случае учет

идет по нарастанию С1402. Применение ВАСТЕС 460 позволило

сократить сроки получения результатов выявления микобактерий до

14 дней, система оказалась пригодной для быстрой идентификации

М. tuberculosis complex и определения лекарственной чувствительно-

сти возбудителя туберкулеза.

Система ВАСТЕС MGIT960 − индикаторные пробирки MGIT (М.

Growth Indicator Tube) с той же средой Middlebrook 7Н9; содержат в

придонной части флюоресцирующий индикатор (трис-4,7-дифенил-1,

10-фенантролин рутениум хлорид пентагидрат), «погашенный» высо-

кими концентрациями 02. В процессе роста МБТ поглощают 02, что

сопровождается усилением свечения индикатора, интенсивность

которого оценивают с помощью трансиллюминатора.

Полностью автоматизированный комплекс позволяет одновре-

менно исследовать лекарственную чувствительность МБТ в 960 ис-

следуемых образцах. Наличие роста МБТ в системе ВАСТЕС реги-

стрируется на 4−5-й день от момента посева. В системе ВАСТЕС, где

используют те же абсолютные концентрации противотуберкулезных

препаратов, учет лекарственной устойчивости идет в течение 6 нед.

В последние годы для быстрого определения лекарственной

устойчивости используют метод микрочипов, основанный на моле-

кулярно-генетическом анализе (ПЦР) выявления точечных мутаций в

гроВ гене, ответственном за устойчивость к рифампицину, и в katG

гене, ответственном за лекарственную устойчивость к изониазиду.

Установлено, что более 95 % устойчивых к рифампицину штам-

мов МБТ содержат точечные мутации (делеции и вставки в гроВ гене,

кодирующих Р-субъединицу РНК-полимеразы) и более 70 % устойчи-

вых к изониазиду штаммов МБТ имеют делеции и вставки в katG

гене, кодирующих каталазу/пероксидазу. Результаты метода микро-

чипов могут быть получены на 3−4-й день исследования

Бактериологическое и паразитологическое исследования проводятся для диагностики и осуществления контроля над распространением инфекции.

Емкости для проб получают накануне в бактериологической (паразитологической) лаборатории.

Подготовка к взятию пробы биологического материала

Для бактериологического и паразитологического исследования

§ Материал для исследований нужно брать до начала антибактериальной терапии или через 8-10 ч после введения последней дозы антибактериального препарата.

§ Чтобы избежать загрязнения пробы микрофлорой окружающей среды, необходимо соблюдать строжайшую асептику.

§ Использовать:

а) стерильные ватные тампоны для взятия биологического материала из раны, со слизистых оболочек (глаз, зева, носа);

б) стерильную петлю для взятия биологического материала из влагалища, анального отверстия;

в) стерильную посуду для непосредственного сбора мочи, мокроты, кала.

§ Количество материала должно быть достаточным для исследования и при необходимости – для его повторения.

§ Соблюдать требования транспортировки:

а) транспортировку полученного биологического материала в лабораторию производят в максимально короткие сроки;

б) если материал нельзя немедленно транспортировать в лабораторию, его следует хранить в холодильнике или в специальных транспортных средах, когда транспортировка длится более 24 ч, а также когда микроорганизмы погибают почти сразу после взятия;

в) биологический материал для культивирования строгих анаэробов транспортировать в специальных флаконах, заполненных газом;

г) материал для бактериологического исследования транспортировать в специальных жестких емкостях (бикс и т.п.).

§ К клиническому образцу необходимо приложить сопроводительный документ, содержащий следующие сведения:

- Ф.И.О. пациента;

- возраст пациента;

- характер (вид) материала;

- цель исследования;

- место жительства, место работы (учёбы, дошкольного учреждения);

- название лечебного учреждения или его отделения;

- номер медицинской карты стационарного больного;

- предполагаемый диагноз;

- результаты предыдущих микробиологических исследований;