Особенности бактериологических и паразитологических

методов диагностики:

При проведении бактериологического и паразитологического исследования емкости для проб получают накануне в бактериологической (паразитологической) лаборатории.

Подготовка к взятию пробы биологического материала для бактериологического и паразитологического исследования:

• Материал для исследований нужно брать до начала антибактериальной терапии или через 8-10 ч после введения последней дозы антибактериального препарата.
• Чтобы избежать загрязнения пробы микрофлорой окружающей среды, необходимо соблюдать строжайшую асептику.
• Использовать:

- ватные тампоны для взятия биологического материала из раны, со слизистых оболочек (глаз, зева, носа);

- проволочную петлю для взятия биологического материала из влагалища, анального отверстия;

- стерильную посуду для непосредственного сбора мочи, мокроты, кала.

• Количество материала должно быть достаточным для исследования и при необходимости для его повторения.
• Соблюдать требования транспортировки:

- транспортировку полученного биологического материала в лабораторию производят в максимально короткие сроки;

- если материал нельзя немедленно транспортировать в лабораторию, его следует хранить в холодильнике, или в специальных транспортных средах, когда транспортировка длится более 24 ч, а также когда микроорганизмы погибают почти сразу после взятия;

- биологический материал для культивирования строгих анаэробов транспортировать в специальных флаконах, заполненных газом;

- материал для бактериологического исследования транспортировать в специальных жестких емкостях (бикс и т.п.)

• К клиническому образцу необходимо приложить сопроводительный документ, содержащий следующие сведения:

o характер (вид) материала;

o ФИО пациента;

o возраст пациента;

o название лечебного учреждения или его отделения;

o номер медицинской карты стационарного больного;

o предполагаемый диагноз;

o результаты предыдущих микробиологических исследований;

o предшествующая антибактериальная терапия;

o дата и время взятия материала;

o цель исследования;

o ФИО врача, направляющего материал для исследования.

2. Иммунологический метод (серологический).

Иммунологический метод (серологический) включает исследования сыворотки крови, а также других биологических субстратов для выявления специфических антител и антигенов. Классическая серодиагностика основана на определении антител к выявленному или предполагаемому возбудителю. Положительный результат реакции свидетельствует о наличии в исследуемой сыворотке крови антител к антигенам возбудителя, отрицательный результат указывает на отсутствие таковых. Обнаружения в исследуемой сыворотке крови антител к возбудителю ряда инфекционных болезней недостаточно для постановки диагноза, поскольку оно может отражать наличие постинфекционного или поствакцинального иммунитета, поэтому исследуют «парные» сыворотки крови, первую, взятую в первые дни болезни, и вторую, взятую с интервалом 7—10 дней. В этом случае оценивают динамику нарастания уровня антител. Диагностически значимо увеличение титра антител в исследуемой сыворотке крови не менее, чем в 4 раза относительно первоначального уровня.

Серологическое исследование для обнаружения антител при инфекционных заболеваниях является более доступным методом лабораторной диагностики, чем выделение возбудителя. Иногда положительная серологическая реакция служит единственным доказательством встречи и взаимодействия организма с возбудителем соответствующего инфекционного заболевания. Предварительный результат может быть выдан через 2 часа.

Иммунологический метод с применением химических и физических меток - иммунофлюоресценция, иммуноферментный анализ, радиоиммунологический анализ, иммун­ный блоттинг, характеризуются применением различных способов детекции (обнаружения) комплекса антиген—антитело на основе химических или физических меток (флуоресцирующих веществ, фермент-субстратных взаимодействий, приводящих к окрашива­нию реакционной смеси, радиоактивных изотопов).

Рис. 6. Реакция прямой гемагглютинации.

3. Биологический метод.

Биологический метод состоит в заражении различным материалом (клиническим, лабораторным) лабораторных животных для индикации возбудителя, а также для определения некоторых свойств микроорганизмов, характеризующих их патогенность (токсигенность, токсичность, вирулентность). В качестве лабораторных животных используют белых мышей, белых крыс, морских свинок, кроликов и др.

Воспроизведение заболевания у животного — абсолютное доказательство патогенности выделенного микроорганизма (в случае бешенства, столбняка и др.). Поэтому биологическая проба на животных является ценным и достоверным диагностическим методом, особенно при тех инфекциях, возбудители которых в исследуемых биологических средах организма человека содержатся в малых концентрациях и плохо или медленно растут на искусственных средах.

Рис. 7. Введение биологического материала лабораторной крысе.

4. Кожно-аллергическая проба.

Кожно-аллергические пробы - это диагностический метод выявления специфической сенсибилизации организма путем введения через кожу аллергена-диагностикума и оценки величины и характера развившегося при этом отека или воспалительной реакции через 24-48 часов (проба Бюрне при бруцеллезе, проба Манту и др.).

 

 

Рис.8. Внутрикожное введение аллергена-диагностикума.

 

5. Молекулярно-генетические методы.

ПЦР - экспериментальный метод молекулярной биологии, позволяющий добиться значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в биологическом материале (пробе).

Рис. 9. ПЦР-метод диагностики инфекционных заболеваний.