Этапы приготовления мазка

Мазок – окрашенный препарат из убитых микроорганизмов, приготовленный на предметном стекле. Готовят мазки по этапам:

1. Приготовление мазка включает нанесение исследуемого материала на предметное стекло.

2. Высушивание при комнатной температуре.

3. Фиксация - умертвление микроорганизмов, проводят несколькими способами: 

▪ нагревая над пламенем спиртовки, 

▪ погружая в этиловый спирт на 10 -15 мин; 

▪ погружая в смесь этиливого спирта и этилового эфира на 10 -15 мин; -

▪ выдерживая в ацетоне 5 мин; 

▪ выдерживая в метиловом спирте 2-3 мин.

4. Окрашивание выполняют, используя анилиновые краски: карболовый фуксин Пфейфера в течение 1 -2мин, метиленовый синий при экспозиции 5 -10 мин.

Существует простой метод окрашивания, когда используют только красительи выявляют особенности морфологии микроорганизмов и сложные методы, когда устанавливают особенности химического состава бактерий, выявляют отдельные бактериальные структуры.

Способность микроорганизмов окрашиваться называют тинкториальными свойствами.

Бактериоскопическое исследование включает приготовление мазка и его микроскопирование, в результате обнаруживают микроорганизмы.

 

Характеристика палочковидных бактерий

Бактерии – одноклеточные организмы растительного происхождения, но лишенные хлорофилла, размножающиеся простым делением. Составляют царство Procariotae (прокариоы) в составе которого четыре отдела Gracilicutes, Firmicutes, Tenericutes, Mendosicutes. По форме бактерии подразделяют на палочковидные, шаровидные, извитые. К царству Procariotae относят также риккетсий, хламидий, микоплазм, актиномицеты.

Палочковидные бактерии самая многочисленная группа прокариот. Имеют цилиндрическую форму и осевую симметрию. Палочковидных бактерий называют от латинского bacterium – палочка.

Большинство бактерий располагается по одиночке, если они располагаются парами, называют диплобактериям, если цепочками – стрептобактериями.

Палочковидных тонких, слегка извилистых называют микобактерями, среди них сапрофиты и возбудители туберкулеза.

Прямые или изогнутые палочки с утолщениями на концах - коринобактерии (от греч. koryne, булова), среди них сапрофиты и возбудитель дифтерии человека.

Длинные, толстые палочки с заостренными концами

– фузобактерии, они сапрофиты и один возбудитель некробактериоза животных Fusobacterium necrophorum.

Палочковидных, образующих споры, называют бациллами (Bacillus, Bac.). Споры – структуры, формирующиеся при неблагоприятных для бацилл условиях. Спора содержит геном, окруженный мощной оболочкой, выдерживающей высокие температуры. За счет мощной оболочки споры могут храниться в окружающей среде десятки лет. По форме споры могут быть овальные, цилиндрические.

Бациллы могут располагаться по одиночке, парами (диплобациллы), цепочками (стрептобациллы). Среди бацилл есть возбудители, полезные, много условно патогенных.

Палочковидных, образующие споры на концах клеток, с диаметром превышающим толщину клетки, называют клостридии (Clostridium, Cl.), располагаются одиночно. Морфология кокков

Кокки от греч. kokkos – ягода, имеют шаровидную форму. Составляют три таксономические группы: грамположительные, грамотрицательные и грамотрицательные с коккобациллами.

Грамположительные относят к отделу Firmicutes в составе которого три семейства: Micrococcaceae, Streptococcaceae, Peptococcaceae и самостоятельные роды.

По расположению клеток друг относительно друга грамположительные кокки подразделяют на микрококки, стрептококки, стафилококки, тетракокки и сарцины.

Микрококки имеют сферическую форму, располагаются по одиночке. Составляют род семейства Micrococcaceae, обитатели почвы, пресных вод, типовой вид Micrococcus luteus.

Диплококки располагаются парами. У человека циркулируют возбудители из рода Neisseria, названного в честь А Нейссера – первооткрывателя гонореи, в составе рода N.gonorrhoeae и N.meningitidis – возбудитель менингококковой инфекции, протекающей с роражением носоглотки с последующей септицемией или менингитом.

Стрептококки составляют род Streptococcus семейства Streptococcaceae, имеют сферическую форму, располагаются цепочками. Известно 20 видов, среди них сапрофиты - обитатели кожи, полезные - продуценты молочнокислого брожения и возбудители. Виды подразделяют по классификации Р. Лэнсфилд (1933) на 17 серогрупп и обозначают заглавными латинскими буквами от А до О. Широко известны 5 возбудителей болезней животных.

 

Таблица 1 - Виды патологии и морфология патогенных стрептококков

 

Признаки		Название возбудителей, серогруппы
	Str. pyogenes	Str. agalactia	Str.  pneumonia	Str. equi	Str.faecalis
Патология	Пиодермии, пневмонии, хо- лициститы у мо- лодняка и взрослых	Серозный и катаральный мастит у коров	Стрептококкоз молодняка	Мыт жеребят	Энтерококковая инфекция поросят
Морфологические свойства	Мелкие, сферической формы, цепочками	Мелкие, сферической формы, цепочками	Мелкие, имеют форму треугольников, парами	Крупные, овальной формы, длинные цепи	Мелкие, сфериче- ской формы, цепочками

 

Стафилококки имеют сферическую форму, располагаются гроздьями (от геч. Staphyle виноградная гроздь, относят к семейству Micrococcaceae и роду Staphylococcus, В составе рода три вида St. аureus, St. saprophyticus, St. еpidermidis). 

St. saprophyticus – сапрофит, обитатель кожи человека и животных, St. epidermidis – условно патогенный. St. аureus - возбудитель 120 клинических форм стафилококковой инфекции у человека и животных. Клинически стафилококковая инфекция может проявляться заболеваниями трех групп:

▪ местным первично-гнойным воспалением кожи и мягких тканей, к которым относят образование фурункулов, карбункулов, абсцессов, флегмон и нагноением ран;

▪ системная стафилококковая инфекция проявляется пневмонией, маститом, отитом, холициститом;

▪ генерализованная – клинически проявляется стафилококковым сепсисом, протекает тяжело на фоне инфекционно-токсического шока (ИТШ).

У молодняка животных стафилококковая инфекция протекает генерализованно, а заболевание называют стафилококкоз.

К грамположительным коккам относят тетракокки – представителей семейства Peptococcaceae, имеют сферическую форму располагаются по четыре, составляют род. Все тетракокки сапрофиты.

Сарцины – крупные, сферической формы клетки, образующие скопления в нескольких плоскостях, сапрофиты, обитатели почвы, кишечника, всегда присутствуют в воздухе. Сарцины объединены в род семейства

Peptococcaceae.