2014-02-17
732
Агар Левинталя. Содержит V- и Х-ростовые факторы. К расплавленной и затем охлажденной до 60° С агаровой среде добавляют, встряхивая, 10% (объем/объем) дефибринированной или цитрированной крови барана или лошади. Кровь вносят дробно (5-7 раз) при тщательном перемешивании в водяной бане (65° С). После внесения всего объема крови питательную среду нагревают до кипения и выдерживают в кипящей воде 5 минут. Затем среду вынимают из бани, на 2-3 минуты оставляют при комнатной температуре. Такую процедуру прогрева питательной среды повторяют трижды, затем среду Помещают на 2 часа в водяную баню с температурой 60° С для осаждения сгустков свернувшейся крови. По истечении указанного срока прозрачную над осадочную часть питательной среды, не взмучивая осадок, разливают по чашкам Петри и пробиркам.
Серологическая диагностика
Таблица 76 - Дифференцирующие признаки некоторых видов актинобацилл
| Признаки | Вид бактерий | |||
| A. pleuropneumoniae | A. suis | A. ligniereisi | A. equili | |
| Способность к росту на агаре Мак-Конки | - | + | + | + |
| Образование H2S | + | - | + | V2) |
| Гидролиз эскулина | V | + | - | - |
| β-гемолиз | + 1) | + | - | - |
| Образование кислоты из: маннита | + | - | + | + |
| Мслибиозы | - | + | - | + |
| млицина | - | + | - | - |
| трегалозы | - | + | - | + |
1)— регистрируется не у всех штаммов; 2)— варьирующий признак.
|
|
|
Антигенная обособленность сероваров выражена у недиссоциированных культур достаточно четко, хотя имеется тесное антигенное родство у Некоторых сероваров. В РФ диагностические иммунные сыворотки против A. pleuropneumoniae как коммерческие препараты не выпускают. При наличии антисывороток серовариантную идентификацию штаммов A. pleuropneumoniae проводят в РА на стекле, в реакции коагглютинации, непрямой иммунофлуоресценции, РДП.
Биопроба. Проводят с целью определения патогенных свойств изолированной культуры бактерий. Наиболее подходящей лабораторной моделью являются морские свинки живой массой 250-300 г. Заражение проводят интрана-зально под легким эфирным наркозом 18-24-часовой агаровой культурой в дозе 0,5-1,0x109 м.к. Вирулентные штаммы возбудителя вызывают гибель животных в течение 1-4 суток после заражения при симптомах поражения легких. На вскрытии у павших животных обнаруживают геморрагическую пневмонию, при достаточно длительном переболевании — фибринозный плеврит. Белые мыши несколько устойчивее к А. pleuropneumoniae.
Естественное переболевание свиней актинобациллезной пневмонией приводит к образованию типо- и видоспецифических антител. Обычно серологические реакции (РСК, РА с 2-меркаптоэтанолом, иммуноферментный метод) оценивают как методы групповой диагностики, которые могут найти применение при комплектовании благополучных стад. Как метод индивидуальной диагностики РСК применим только к мелким хозяйствам, где число реагирующих невелико. Большинство авторов считают, что титр РСК 1:10 как диагностический. В РФ диагностические антигены для РСК и других серологических реакций не производят.
|
|
|
Питательные среды «Шоколадный» агар (агар с вареной кровью)
Содержит V (НАД)- и Х-факторы. Агаровую питательную среду (МПА, агар Хоттингера) расплавляют на водяной бане и, не охлаждая, добавляют в нее 10-15% стерильной дефибринированной или нитрированной крови лошади, барана или кролика. После охлаждения питательной среды до 55-60°С ее перемешивают и разливают по чашкам Петри или пробиркам.
