Микроскопическое исследование материала. Бактериологическое исследование

Бактериологическое исследование

Лабораторная диагностика эперитрозооноза

Серологическая диагностика

Наличие анаплазмозного антигена позволяет для целей серологической ди­агностики анаплазмоза применять непрямой метод флуоресцирующих антител, РСК. В соответствии с утвержденной «Методикой постановки РСК для диагностики анаплазмоза крупного и мелкого рогатого скота» (1971) сыворотки крови, разведенные 1:5, включая контрольные позитивную и негативную, инактивируют при 58-60°С в течение 30 минут. Сыворотки крови при исследовании разводят от 1:5 до 1:1280. Эритроциты использу­ют в виде 2%-ной взвеси, гемолизин в тройном титре. Антигены из A.marginale готовит ВНИИЭВ. Комплемент берут в двойном количестве. РСК ставят в объеме 0,5 мл. Первую фазу РСК проводят при 37°С в течение 60 минут, вторую фазу — 20 минут. Задержку гемолиза на два креста и более считают положительным результатом РСК. Любой титр антител счи­тается диагностическим, титрование сывороток позволяет сделать заклю­чение о стадии носительства (титр до 1:40) или переболевания (более 1:40, вплоть до 1:1280).

Из представителей рода Eperytrozoon в патологии животных важное значение имеют сле­дующие виды: E.ovis — вызывает у ягнят 2-10-месячного возраста забо­левание с выраженными клиническими симптомами, анемию, потерю веса; E.suis — возбудитель свиного эперитрозооноза, обычно протекающего субклинически, однако возможна анемия, эмбриональная смертность и абор­ты. Ни один вид эперитрозоонов на бесклеточных питательных средах куль­тивировать не удается. Лабораторная диагностика основана на результа­тах микроскопического и серологического исследований. В РФ регистрируется эперитрозооноз овец.

От убитого или павшего животного (овцы) в лабораторию направляют ку­сочки селезенки, печени, лимфатических узлов, мазки крови.

(«Методические указания по лабораторным исследованиям на эперит­розооноз овец», 1985).

Из органов делают мазки-отпечатки, фиксируют метанолом (3-5 ми­нут) или этанолом (20-25 минут) и окрашивают по Романовскому 30-45 минут (3 капли азур-эозина на 2 мл дистиллированной воды с рН 7,0-7,2) или проводят прямое флуорохромировапие акридиновым оранже вым. Эперитрозооны морфологически представляют кокковидные или кольцевидные образования размером 0,4-1,5 мкм, редко палочки розо­ватого или розово-фиолетового цвета. На поверхности эритроцитов воз­можно скопление кольцевидных форм. Согласно «Методическим указа­ниям по лабораторным исследованиям на эперитрозооноз овец» (1985) для дифференциации эперитрозоонов от анаплазм, бабезий, пироплазм и тейлерий рекомендуется руководствоваться критериями, изложенными в таблице 99.

Таблица 99 - Дифференциальная таблица возбудителей