Микроскопическое исследование материала. Бактериологическое исследование

Бактериологическое исследование

Лабораторная диагностика эрлихиозов

Возбудители эрлихиозов относятся к семейству Rickettsiaceae, трибе Ehrlichiae, роду Ehrlichiae. Эрлихии не патогенны для человека, вызывают заболевания животных, некоторые из них приспособились к обитанию в организме членистоногих, для других представите­лей векторы не установлены. На бесклеточных питательных средах и кури­ных эмбрионах эрлихии культивировать не удается, лабораторные живот­ные устойчивы. Наиболее значимы в патологии животных следующие виды эрлихии: Ehrlichia phagocytophila (вид перенесен в род Anaplasma) — вы­зывает лихорадочное заболевание крупного рогатого скота (клещевая ли­хорадка), овец и диких животных, вектор Ixodes ricinus, заболевание мо жет сопровождаться абортами, снижением удоев, животные худеют; Ehrlichia equi — возбудитель лошадиного эрлихиоза, распрост­ранен в основном в США, вектор не известен, болезнь проявляется лихо­радкой, отеками конечностей; Ehrlichia canis — возбу­дитель тропического риккетсиоза собак (тропическая панцитопения собак), вектор Rhipicephalus sanguineus. Лабораторная диагностика в основном базируется на результатах микроскопического исследования материала, применяют иммунологические методы диагностики и изоляцию возбудите­ля, а также серодиагностику.

При подозрении на инфекцию Е. phagocytophila для исследования берут кровь через 3-4 дня после начала лихорадки, делают мазки или цитрированную кровь хранят при 4°С, в этом случае возбудитель остается жизнеспособным до семи суток, при -70° С — несколько месяцев. Для исследования на эрлихиоз лошадей берут пробы крови на 3-5-е сутки после лихорадочного со­стояния. С целью диагностики эрлихиоза собак берут кровь на 2-3-й сутки после повышения температуры или биоптаты из легких, печени, селезенки.

Мазки из крови, биоптатов фиксируют метанолом, окрашивают по Романовскому-Гимза, при наличии антисывороток используют метод флуорес­цирующих антител.

E.phagocytophila обнаруживают в гранулоцитах, реже — в моноцитах. В период риккетсемии поражены до 6-50% гранулоцитов. Для отрицательного ответа необходимо исследовать не менее 100 клеток. Морфогенез возбудителя складывается из превращения элементарного тельца овальной или кокковидной формы красного цвета диаметром около 0,4-0,5 мкм в тельце размером 1-2 мкм, с последующей трансформацией в морулу (образование похоже на тутовую ягоду) диаметром 2-4 мкм. Цикл развития завершается распадом морулы на элементарные тельца.

Есть данные о применении флуоресцирующих антител для обнаружения возбудителей в головном мозге.

При исследовании на инфекцию Е. canis возбудитель можно обнаружить в окрашенных мазках крови на 2-3-й сутки после появления температуры, лучше в мазках из лейкоцитарного слоя. Возможно обнаружение возбуди­теля в биоптатном материале из печени, селезенки, легких. Морфология возбудителя такая же, как и у E.phagocytophila, локализуется в моноцитах или лимфоцитах.

E.equi наиболее успешно удается обнаружить в мазках из свежей крови, поражено бывает от 0,5 до 73% гранулоцитов (в среднем 35%). Элементар­ные тельца имеют диаметр около 0,2 мкм, цвет от голубого до серо-голубо­го, морула достигает диаметр 5 мкм. С успехом апробирована для выявления эрлихий полимеразная цепная реакция.