Методы детекции биополимеров
Использование радиоизотопов
«взлеты и падения применимости»
В 70 годы у метода с исп радиоактивных изотопов не было конкурентов.
Ео с этим методом боролись по причине опасности и дороговизны: недешевое производство и дорого обеспечивать технику безопасности.
В СССР был крупный завод, который производил радиоизотопы, был Ташкентский завод.. сейчас завод закрыт.
СССР был единственным поставщиком 33Р
Сейчас в России всего 1 подобный завод – Ленинградский, в полумертвом состоянии.
Совсем избавиться от метода не удается, так как он обладает определенными преимуществами:
Ø метки не изменяют химических и физических свойств молекул; ни один фермент не может отличить 33Р, 32Р и 31Р
Ø возможно избирательно детектировать отдельные молекулы и группы атомов; причем даже внутри одной молекулы.
Недостатки:
v опасность при работе;
v недолговечность (время жизни обратно пропорционально чувствительности);
v невозможность управлять интенсивностью метки; процесс распада – стохастичесикй,
|
|
α-распад (избыток массы):
xN → x-4N + 4He (α) + γ
238U → 234Th + 4He + γ
β+-распад (избыток протонов):
p+ → n + β+ + ν (+ E)
18 F → 18 O + β + + ν + Q
β--распад (избыток нейтронов):
n → p+ + β- + ν (+ E)
P → S, S → Cl, C → N, H → He
14 C → 14 N + β - + ν + Q
K-захват (недостаток нейтронов):
p+ + e- → n
125 I → 125 Te + ν + γ
Как правило, используют те атомы, которые водят в состав молекулы, либо легко туда включаются.
Мы детектируем либо ē, либо β+.
K-захват – детектируем электроны с внутренних эл. оболочек. Электрон соединяется с протоном, уходя с ближайшей к ядру оболочки. На его место приходит электрон со следующей оболочки и т.д. Изменяется Е, выдеяются γ -кванты. При этом регистрируются также бета-частицы! Откуда берутся? – вопрос.
Основной постулат - вероятность для всех атомов распасться в следующий момент одинакова.