Стандарт действий медицинской сестры при определении группы крови по системе АВО

- На пластине для определения группы крови слева направо подписывают группы сывороток 0 αß (I), Аß (II), Вα (III) и в углу ФИО пациента.

- В два ряда по три большие капли соответственно подписям на пластинку слева направо наносятся стандартные сыворотки 0 αß (I), Аß (II), Вα (III) (0,1 мл). Каждая сыворотка наносится отдельной пипеткой (чаще используют глазные пипетки).

- Рядом с каждой каплей сыворотки палочкой (или отдельной пипеткой) наносят исследуемую кровь по одной маленькой капле (0,01 мл).

- Cоотношение "сыворотка: кровь" должна быть 10:1.

(Ориентировочно капля стандартной сыворотки должна быть ровна копеечной монете, капелька крови = головке портняжной булавки)

- Капли тщательно перемешивают палочками (каждую каплю - отдельной палочкой, углом предметного стекла). Наблюдение за ходом реакции проводят при лёгком покачивании пластинки.

- По истечении 3-х минут (но не раньше) в те капли, где наступила агглютинация эритроцитов, для исключения ложной агглютинации добавляют по одной капле (0,05 мл) изотонического раствора хлорида натрия и продолжают наблюдение при покачивании пластин. После внесения физиологического раствора ложная агглютинация исчезает, истинная - остаётся без изменения или усиливается.

- Общее время наблюдения реакции - 5 минут.

Данные оценки результатов реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками:

Группы крови	Наличие (отсутствие) агглютинации
О(I)	А(II)	В(III)	АВ(IV)
О αβ (I)	-	-	-
А β(II)	+	-	+
В α(III)	+	+	-
АВ (IV)	+	+	+	-

Агглютинация считается истинной, когда в капле появляются красные комочки, а сыворотка осветляется и, если после прибавления к сыворотке, смешанной с кровью, капли физраствора, склеивание эритроцитов не исчезает.

Отрицательным результат считается в том случае, если капля остаётся гомогенно окрашенной и не содержит зёрнышек и комочков.

При определении группы крови с 3 парами стандартных сывороток возможны 4 варианта результатов:

1) признаков агглютинации не даёт ни одна из трёх пар стандартных сывороток - исследуемая кровь принадлежит к 0(I) группе;

2) агглютинации нет с сывороткой A(II) группы. В сыворотках 0(I) и B(III) групп обнаружена агглютинация - исследуемая кровь A(II) группы;

3) агглютинации нет с сывороткой B(III) группы. В сыворотках 0(I) и A(II) групп - агглютинация. Кровь – B(III) группы;

4) все сыворотки вызвали агглютинацию эритроцитов.

В последнем случае для исключения неспецифической агглютинабельности эритроцитов необходимо провести дополнительное исследование со стандартной сывороткой AB(IV) группы. Лишь при отсутствии агглютинации при исследовании с сывороткой IV группы позволяет отнести исследуемую кровь к группе AB(IV).

2.Определение групп крови с моноклональными антителами (цоликлонами анти-А и анти-В, анти-АВ).

. Определение групп крови с моноклональными антителами (цоликлонами анти-А и анти-В, анти- АВ) производиться обычными методами выявления антигенов эритроцитов: при массовом определении в учреждениях служб крови-на планшетах или автоматических системах, при индивидуальном –на белой фарфоровой или другой пластине со смачиваемой поверхностью.

Стандартные реагенты - цоликлоны анти-А и анти-В, анти -АВ получены методом лиофильной сушки. Они не являются продуктами клеток человека и поэтому исключена контаминация препаратов вирусами гепатита и СПИДа (синдрома приобретённого иммунодифицита).

Цоликлоны анти-А (розового цвета) и анти-В (синего цвета) выпускаются во флаконах или ампулах по 20, 50, 100 и 200 доз.

Для каждого определения группы крови достаточно применять по одной серии цоликлонов анти-А и анти-В (в виду высокой активности реагентов).

Определение групп крови выполняет врач. Медсестра готовит оснащение для выполнения тестов:

- планшеты стандартные

- штатив для пробирок с кровью доноров (реципиентов)

- штатив для цоликлонов

- пипетки

- перчатки

- песочные часы на 5 минут

- журнал для регистрации результатов

- емкости для дезинфекции использованных предметов.

-На планшет или фарфоровую пластинку цоликлоны анти-А и анти-В наносят по одной большой капле (0,1мл) под соответствующие надписи:анти-А, анти-В.

- Рядом с каплями антител наносят исследуемую кровь по одной маленькой капле, приблизительно в 10 раз меньше капли антител (0,01мл).

-При определении группы крови на планшете антитела и кровь смешивают тщательно вымытым сухим шариком, покачивая планшет.

При определении на фарфоровой пластинке кровь и антитела смешивают стеклянной палочкой, которую предварительно промывают и досуха вытирают.

Наблюдение за ходом реакции с цоликлонами проводят при лёгком покачивании пластинки или планшета в течение не более 5 мин.

- Результат реакции в каждой капле может быть положительным или отрицательным.

Положительный результат выражается в агглютинации эритроцитов.

При отрицательной реакции капля остаётся равномерно окрашенной в красный цвет – агглютиногены в ней не обнаружены.

Агглютинация цоликлонами анти-А и анти-В обычно наступает в первые 3-5 сек.

Наблюдение следует вести 2-5 мин в виду возможности более позднего наступления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А и В.