Билет № 25 Вирус гепатита В

1. Иммуноглобулины (ИГ) представляют собой группу эволюционно и структурно родственных белков, обладающих свойствами антител. Основной структурной единицей молекул явл. гетеротетрамер, построенный из идентичных молекул, образованных тяжелыми и легкими полепептидными цепями и расположенных по обе стороны от оси симметрии. Тяжелые цепи содержат от 450 до 550 аминокислот. Легкие около 220. Различают 5 типов тяжелых цепей: a, g, m и d. В составе константных областей тяжелых и легких цепей иммуноглобулинов могут быть выявлены аллотипические антигенные детерминанты, определяющие антигенные различия в нутрии одного и того же изотопа антител. В нормальной сыворотке крови 80% всех ИГ составляют lgg, на долю lgm – 6%, lga – 13,5%, lge и lgd – все остальные. На N концах тяжелых и легких цепей расположены вариабельные области которые в сочетании образуют антигенсвязывающую структуру – паратоп в составе Fab фермента. Fab фермент учавствует в реакциях антиген-антитело, но не во всех в виду того что обрезан FC фрагмент – обеспечивает побочный эффект антител: вз-ет с комплиментом, опсонинами, ревматоидным фактором, неспецифически вз-ет с белком AS и G – белком стрептококков.

IgG – способен преодолевать плацентарный барьер и обеспечивать гуморальный иммунитет новорожденных, он составляет осн. массу антител при вторичном иммунном ответе. Обеспечивает антибактериальную и антитоксическую защиту. Продуцентами IgG являютсяплазматические клетки, возникающие в ходе индуцированной антигеном дифференцировки В-лимфоцитов –

предшественников, несущих мембранные IgM и IgG или в результате клональной экспансии уже сформированных В – клеток памяти.

Ig М пентамер, состоящий из 5 4х цепочечных структур, его наз. макроглобулином. Он синтезируется раньше других классов в онтогенезе. Этот класс ИГ первым появляется на самых ранних стадиях гуморального иммунного ответа на инфекцию. В качестве фактора противоинфекционной защиты он функционирует в лимфе и межклеточной среде. В сыворотке норма от 0,5 до 1,5 мг/мл.

Ig А представлен 2 классами А1 и А2 и существует в 2х различных формах – секреторной и сывороточной. Является основным ИГ секретов слизистых и экзокринных желез. Его синтезируют лимфоидные ткани, связанные со слизистыми покровами кишечника, дыхательных и мочеполовых путей, а также с железистым эпителием молочных, слюнных и др. желез. В организме секреторный Ig А препятствует адгезии микроорганизмов на слизистых и реализации их патогенного потенциала. В сыворотке содержится в количестве 2-3 г/л.

Ig Е основное свойство состоит в способности сенсибилизировать в отношении определенного АГ мембраны тучных клеток и базофилов. Связывание молекул с мембранным Ig Е служит сигналом для освобождения из этих клеток ряда БАВ, вызывающих спазм гладкой мускулатуры. Повышение проницаемости сосудов, воспалительные реакции и др. сдвиги, лежащие в основе явлений гиперчувствительности немедленного типа. Концентрация в сыворотке крови 4,8 – 240 нг/мл. Увеличение его продукции наблюдается при аллергических заболеваниях, иммунодифецитах, паразитарных инвазиях.

IgD Находится на поверхности В – лимфоцитов, выполняя фунцию иммуноглобулиновых АГ- распознающих рецепторов. В процессе дифференцировке В лимфоцитов эти рецепторы

2. Гепатита А

Семейство Picornaviridae род Hepatovirus. Это РНК-содержащий вирус,.

Вирус выращивают в культурах клеток. цитопатический эффект не выражен.

инактивируется при кипячении в течение 5 мин. Относительно устойчив во внешней среде (воде).

Источник - больные. Механизм заражения — фекально-оральный. Вирусы выделяются с фекалиями в начале клинических проявлений. С появлением желтухи интенсивность выделения вирусов снижается. Вирусы передаются через воду, пищевые продукты, руки. Болеют преимущественно дети в возрасте от 4 до 15 лет.

Патогенез: Обладает гепатотропизмом. После заражения репликация вирусов происходит в кишечнике, а оттуда через портальную вену они проникают в печень и реплицируются в цитоплазме гепатоцитов. Повреждение гепатоцитов возникает в результате иммунопатологических механизмов.

Клиника. Инкубационный период - от 15 до 50 дней. Начало острое, с повышением т-ры и тошнотой, рвотой). Возможно появление желтухи на 5-й день. Клиническое течение заболевания легкое, без особых осложнений. Продолжительность заболевания 2 нед. Хронические формы не развиваются.

Микробиологическая диагностика. Материал для исследования - сыворотка и испражнения. Диагностика основана главным образом на определении в крови IgM с помощью ИФА, РИА и иммунной электронной микроскопии. Этими же методами можно обнаружить вирусный антиген в фекалиях. Вирусологическое исследование не проводят.

Гепатит Е

фекально – оральным механизмом передачи.

семейство Caliciviridae.

Вирион безоболочечный, сферический.. Геном — однонитевая плюс-РНК, которая кодирует РНК-зависимую РНК-полимеразу, папаинподобную протеазу и трансмембранный белок, обеспечивающий внедрение вируса в клетку.

Эпидемиология, клиника. Основной путь передачи — водный. Инкубационный период 2—6 недели. Поражение печени, интоксикацией, желтухой.

Микробиологическая диагностика: 1) серологический метод — в сыворотке, плазме крови с помощью ИФА определяют: антитела к вирусу (анти-HEV IgM, анти-HEV IgG); 2) молекулярно-генетический метод — применяют ПЦР для определения РНК вируса (HEV RNA) в кале и в сыворотке крови больных в острой фазе инфекции.

Вирус гепатита В - семейс­тво Hepadnaviridae род Orthohepadnavirus.

ДНК-содержаший вирус сферичес­кой формы. Состоит из сердцевины, состоящей из 180 белковых частиц, составляющих сердцевинный НВс-антиген и липидсодержащей оболоч­ки, содержащей поверхностный HBs-антиген. Внутри сердцевины находятся ДНК, фермент ДНК-полимераза, обладающая ревертазной ак­тивностью, и концевой белок НВе-антиген.

Геном представлен двунитевой ДНК коль­цевой формы.

культивируется только в культуре клеток.

Вирус устой­чив к длительному воздействию кислой среды, УФ-излучению, действию спирта, фенола.

Антигенная структура.Слож­ная. В суперкапсиде вируса находится HBs-антиген, который ло­кализован в гидрофильном слое на поверх­ности вириона. В формировании HBs-антигена участвуют 3 полипептида в гликозилированной форме:preSl — большой полипептид; preS2 — средний полипептид; S — малый полипептид.

Развитие инфекционного процесса при попадании в кровь. Заражение проис­ходит при парентеральных манипуляциях (инъ­екциях, хирургических вмешательствах), пере­ливании крови.

Инкуба­ционный период 3—6 месяцев. Инфекционный процесс наступает после проникновения вируса в кровь. ВГВ из крови эндоцитозом прони­кает в гепатоцит. После проникновения вируса происходит достраивание плюс-нити ДНК ДНК-полимеразой до пол­ноценной структуры. Клиническая картина характеризуется сим­птомами поражения печени, в большинстве случаев сопровождается развитием желтухи.

Исполь­зуют серологический метод и ПЦР. Методами ИФА и РНГА в крови определяют маркеры гепатита В: антигены и антите­ла. ПЦР определяют наличие вирусной ДНК в крови и биоптатах печени. Для острого гепатита ха­рактерно обнаружение HBs антигена, НВе антигена и анти-HBc-IgM антитела.

Вирус гепатита С относится к се­мейству Flaviviridae роду Hepacivirus.

Сложноорганизованный РНК-содержащим вирус сфе­рической формы. Геном представлен одной линейной «+» цепью РНК, обладает большой вариабельностью.

Антигенами яв­ляются:

1. Гликопротеины оболочки

2. Сердцевинный антиген НСс-антиген

3. Неструктурные белки.

ВГС не культиви­руется на куриных эмбрионах, не облада­ет гемолитической и гемагглютинирующей активностью.

Заражение ВГС аналогично заражению ВГВ. Наиболее часто ВГС передается при переливаниях крови, трансплацентарно, половым путем.

Часто встречаются безжелтушные формы, течение инфекции в острой форме, в 50 % случаев процесс переходит в хроническое те­чение с развитием цирроза и первичного ра­ка печени.

Используются ПЦР и серо­логическое исследование. Подтверждением активного инфекционного процесса является обнаружение в крои вирусной РНК ПЦР. Серологическое исследование направлено на определение антител к NS3 методом ИФА.

Вирус гепатита D - дефектный вирус, не имеющий собственной оболочки. Вирион имеет сферическую форму, который состоит из однонитчатой РНК и сердцевинного HDc-антигена. Эти белки регулируют синтез генома ви­руса: один белок стимулирует синтез генома, другой — тормозит. Различают три генотипа вируса. Все генотипы относятся к одному серотипу.

Резервуаром BFD в природе являются но­сители ВГВ. Заражение BFD аналогично ин­фицированию ВГВ.

осуществляется серологичес­ким методом путем определения антител к BFD методом ИФА.

Профилактика: все те мероприятия, которые исполь­зуют для профилактики гепатита В. Для ле­чения используют препараты интерферона. Вакцина против гепатита В защищает и от гепатита D.

3. В настоящее время ИФА является широко распространенным иммунологическим методом. В отличие от МФА ИФА может:

АТ или АГ фиксируются не на стеклах, а на внутренней поверхности полистериловых планшетов для иммунологических реакций,

В качестве метки используется не флюорохром, а фермент пероксидаза,

Реакция учитывается не под микроскопом, а визуально.

Метод ИФА с использованием индикаторных полосок. В этом методе используется система ферментных каналов, включающих 2 фермента. Эта пара подбирается таким образом, чтобы продукты одной ферментативной реакции служили субстратами для второго фермента. Поверхность индикаторной полоски покрыта АТ против АГ. Вместе с АТ на твердой фазе иммобилизованы молекулы фермента глюкооксидазы. Готовую полоски погружают в исследуемый образец. Затем полоску переносят в раствор, содержащий конъюгат стандартного АГ с пероксидазой. Атомарный кислород в результате ферментативного расщепления перекиси окисляет хромоген. В результате образуется голубое не растворимое соединение, проявляющееся на полоске. Для упрощения интерпритации полученных результатов в индикаторные полоски вводят внутренний стандарт.