Методические рекомендации к выполнению работы. После рассмотрения учебных вопросов и инструктажа по технике безопасности студенты делятся на бригады и выполняют задания по программе УИРС

После рассмотрения учебных вопросов и инструктажа по технике безопасности студенты делятся на бригады и выполняют задания по программе УИРС.

УИРС

Определить влияние следующих основ на скорость высвобождения натрия салицилата из мазей:

1. Вазелиновая основа (а₁)

2. Метилцеллюлозная основа (a₂)

3. Гидрогенизат растительного масла с растительным маслом (а₃)

4. Вазелин-ланолиновая основа (a₄)

5. Эмульсионная в/м основа (a₅)

6. Эмульсионная м/в основа (а₆)

7. Вазелин-аэросильная основа (а₇)

8. Рицин-аэросильная основа (а₉)

ТЕХНОЛОГИЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ 10% МАЗИ C НАТРИЯ САЛИЦИЛАТОМ

1. Нa вазелиновой основе: к растертому в ступке порошку натрия салицилата частями добавляют вазелин и диспергируют до однородной консистенции.

2. На метилцеллюлозной основе:

состав: метилцеллюлозы 6,0

глицерина 20,0

воды очищенной 74,0

Порошок метилцеллюлозы заливают дистиллированной водой, нагретой до 70—80°С, ставят для набухания в холодильник. Добавляют глицерин и оставшееся количество воды. К готовой основе частями добавляют натрия салицилат.

3. На гидрофобной основе:

состав: гидрогенизата подсолнечного масла 10,0

подсолнечного масла 5,0

к растертому порошку натрия салицилата по частям добавляют подсолнечное масло и ГПМ.

4. На вазелин-ланолиновой основе:

состав: вазелина 50,0

ланолина 50,0

к сплаву ланолина с вазелином добавляют порошок натрия салицилата и тщательно перемешивают.

5. На эмульсионной основе в/м:

состав: вазелина 60,0

эмульгатора Т₂ 10,0

воды очищенной 30,0

к сплаву эмульгатора и вазелина при перемешивании добавляют воду очищенную. Основу перемешивают с натрия салицилатом до однородности.

6. На эмульсионной основе м/в:

состав: ланолина б/в 5,0

эмульгатора Т₂ 5,0

масла вазелинового 16,0

воды очищенной до 100,0

эмульгатор смешивают при нагревании с ланолином и вазелиновым маслом и при перемешивании порциями добавляют воду. К полученной основе добавляют натрия салицилат и смешивают до однородности.

7. На вазелин-аэросильной основе:

состав: вазелинового масла 95,0

аэросила 5,0

вазелиновое масло смешивают с аэросилом. В гель вносят порошок натрия салицилата и перемешивают до однородности.

8. На рицин-аэросильной основе:

состав: аэросила 7,0

масла касторового 93,0

касторовое масло перемешивают с аэросилом. К полученному гелю прибавляют натрия салицилат и перемешивают до однородности.

Каждая бригада берет по 0,5 г мази для проведения анализа.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ИНТЕНСИВНОСТИ ВЫСВОБОЖДЕНИИ НАТРИЯ САЛИЦИЛАТА ИЗ МАЗИ.

Интенсивность высвобождения натрия салицилата из мази определяют в приборе Л.Крувчинского. В термостатируемые стаканы помещают 30 мл воды очищенной, температура которой 32±0,5°С. Исследуемое количество мази (0,5г) наносят равномерным слоем на внутреннюю поверхность пленки тубуса прибора. Тубус погружают на 1мм в среду растворителя, подготовленный прибор помещают и термобаню (32°С). Отбор проб диализата по 1 мл производят с помощью пипетки через равные промежутки времени (15 мин.) в трех повторностях на протяжении 60мин с немедленным восполнением взятого количества растворителя в термостатируемые стаканы.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ НАТРИЯ САЛИЦИЛАТА В ПРОБАХ ДИАЛИЗАТА.

К 1 мл диализата прибавляют 1 мл реактива (железа нитрит) и 13мл воды очищенной. Появляется сиреневое окрашивание. Оптическую плотность образовавшегося комплекса определяют на КФК-2-ХІЕ2 при зеленом светофильтре, кюветы на 30мм. В качестве контрольного раствора используют смесь раствора реактива и воды. Количественное содержание натрия салицилата в диализате находят с помощью калибровочного графика (рис.6.). Рассчитывают количественное содержание вещества в диализате.

Например: через 15 мин.: в 1 мл — 0,2 мг,

в 30 мл — 6 мг;

через 30 мин.: в 1 мл — 0,35 мг,

в 30 мл — 10,5+0,2=10,7 мг.

ВЫЧИСЛЕНИЕ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ ДОСТУПНОСТИ НАТРИЯ САЛИЦИЛАТА В МАЗЯХ

На основе полученных данных по освобождению натрия салицилата из мази определяют константу скорости высвобождения и величину полурастворения Т_50% по формуле:

, где

0,693 — постоянная величина;

К — константа скорости растворения.

По схеме однофакторного анализа проводят обработку полученных результатов. На основании полученных данных строят ряд предпочтительности.

В конце занятия студенты обобщают результаты вычислений и делают выводы о влиянии вида мазевой основы на скорость высвобождения натрия салицилата из мазей, на предполагаемую биологическую доступность того вещества в мазях.

Рис 6. Калибровочный график зависимости оптической плотности (Д) от концентрации (С) натрия салицилата

УИРС

Группы по 2-3 студента изучают влияние факторов: вида основы (фактор А) и природы эмульгатора (фактор В) на интенсивность высвобождения натрия салицилата из суппозиториев.

Обозначения:

Фактор А — вид основы:

a₁ — заводская жировая основа (ЗЖО);

а₂ — гидрогенизат хлопкового масла (ГХМ);

a₃ — гидрогенизат подсолнечного масла (ГПМ);

Фактор В — вид эмульгатора:

в₁ — эмульгатор №1;

в₂ — эмульгатор Т₂;

в₃ — твин 80.

Количество эмульгатора составляет 2% от массы суппозитория. Исследования проводят по двухфакторному плану проведения эксперимента.

Таблица 3

Фактор А	Фактор В
в1	в2	в3
a1	a1в1	a1в2	a1в3
a2	a2в1	a2в2	a2в3
a3	a3в1	a3в2	a3в3

Суппозитории с натрия салицилатом готовят методом выливания в формы. Для этого определяют факторы замещения для предложенных основ с натрия салицилатом по методике ХНИХФИ. Расчеты проводят по уравнению:

, где

Ф — фактор замещения;

Р — масса суппозиторной основы, помещаемой в гнездо формы;

Г — масса суппозитория с лекарственным веществом;

а — количество вещества в одном суппозитории.

Количество суппозиторной основы, необходимое для приготовления суппозиториев, определяют по формуле:

О = Р х n – Ф х А, где

О — количество суппозиторной основы;

n — количество приготовленных суппозиториев;

А — количество лекарственного вещества по прописи для всех суппозиториев;

Ф — фактор замещения.

Суппозитории готовят смешиванием порошка натрия салицилата с предварительно расплавленной основой. Полуохлажденную массу заливают в форму, ставят в холодильник. После застывания суппозитории анализируют.

Каждая бригада студентов готовит по 3 суппозитория с содержанием вещества 0,2г.

Определение интенсивности высвобождения натрия салицилата из суппозиториев

Интенсивность высвобождения натрия салицилата из суппозиториев определяют в приборе по методу Л.Крувчинского. С этой целью в диализную трубку помещают 1 суппозиторий. В качестве диализной среды — вода очищенная (30 мл). Через 30мин. диализ заканчивают и берут пробы для анализа.

Для количественного определения: к 1 мл диализата прибавляют 1 мл раствора нитрата железа в 0,007 н. азотной кислоте и 13 мл воды очищенной. Появляется сиреневое окрашивание. Оптическую плотность определяют на КФК-2-4ХП.2. Светофильтр — зеленый, кювета — 30мм. В качестве контроля используют раствор реактива с водой.

Количественное содержание натрия салицилата устанавливают с помощью калибровочного графика (см. калибровочный график по натрия салицилату).

Полученный результат заносят в таблицу и по схем» двухфакторного дисперсионного анализа проводят обработку результатов.

Вычислительную схему для двухфакторного дисперсионного анализа без повторных наблюдений рассмотрим на числовом примере.

ПРИМЕР. При разработке оптимального состава суппозиторной массы для получения суппозиториев с амидопирином изучали влияние вида основы (фактор А) и вида эмульгатора (фактор В).

По результатам испытания суппозиториев на высвобождение амидопирина через 30мин проведен дисперсионный анализ.

Таблица 4

Интенсивность высвобождения амидопирина из суппозиториев

Фактор А	Фактор В	Сумма
в1	в2	в3	38,46
a1	10,3	9,03	9,03	42,8
a2	9,3	9,8	11,2	54,8
a3	13,4	13,0	14,1	136,06
Сумма	33,0	31,88	33,44

Общая сумма квадратов наблюдений равна

Корректирующий член

Сумма квадратов, характеризующая степень изменении исследуемого параметра от изменения факторов А и В, равна

Вычисляют суммы квадратов, необходимые для проведения дисперсионного анализа.

SSA=SS₃—SS₂= 1578,512–1543,374=35,138

SSB=SS₄—SS₂= 1548,043–1543,374=4,669

с числом степеней свободы соответственно

FA = r—1 = 3—1=2 и

FB = g–l = 4—1=3

Общая сумма равна

SS_oбщ. = SS₁—SS₂=1578,26—1543,374=43,886

с числом степеней свободы

Fобщ.=rg–l=3·4–1–11.

Остаточная сумма равна

SS_oст. = SSoбщ.–SSA–SSB=43,886—35,138–4,669=4,079

с числом степеней свободы

F_oст.=(r–1)·(g–1) = (3–1)·(4–1)=6

Находят средние квадраты

Проводят проверку значимости с помощью F-критерия.

,

Результаты статистического анализа представлены в таблице.

Таблица 5

Дисперсионный анализ экспериментальных данных

Источник изменчи-вости	Сумма квадратов (SS)	Число степеней свободы (F)	Средний квадрат (MS)	Fэксп.	Fтабл.
Фактор А	35,138		17,569	25,87	5,14
Фактор В	4,669		1,556	2,29	4,76
Ошибка	4,079		0,679	–	–
Общ.сумма	43,886

На основании дисперсионного анализа можем сделать вывод, что основа (фактор А) существенно влияет на интенсивность высвобождения амидопирина из суппозиториев, а вид эмульгатора (фактор В) существенного влияния не оказывает.

Делают выводы о влиянии изучаемых факторов на высвобождение натрия салицилата из суппозиториев. Строят ряд предпочтительности на основании сравнения средних значений по каждому из факторов.