Методы окраски

ПРИЖИЗНЕННАЯ (ВИТАЛЬНАЯ) ОКРАСКА МИКРООРГАНИЗМОВ

Окрашивание живых микроорганизмов позволяет изучить характер и степень их подвижности. Применение этих методов ограничивается слабой восприимчивостью живых клеток к анилиновым красителям и нестойкой окраской препаратов. Следует также учесть, что при таких методах окра­ски микробы сохраняют жизнеспособность, и препараты могут яв­ляться инфекционным материалом.

Окраска метиленовым синим

Техника. Чистое предметное стекло смачивают кипящим насыщенным водным раствором метиленового синего. Когда краска на стекле высохнет, его протирают сухой тряпочкой до нежно-голубой окраски. На подготовленное таким образом стекло наносят каплю исследуемой культуры, покрывают покров­ным стеклом и микроскопируют.

Микроскопическая картина. Микробы постепенно окрашива­ются в бледно-голубоватый цвет.

Окраска нейтральным красным

Приготовление красителя: насыщенный на хо­лоду водный раствор нейтральрота разводят физиологическим раствором хлористого натрия 1:100.

Техника. Каплю исследуемого материала смешивают на предметном стекле с каплей разведенного нейтральрота. Препарат покрывают по­кровным стеклом и микроскопируют с иммерсией.

Микроскопическая картина. Микробы постепенно окрашива­ются в розоватый цвет.

Негативный способ окраски живых бактерий

Для окраски используют тушь, негрозин, конго крас­ный. Тушь чертежную разводят дистиллированной водой в соот­ношении 1:10. Конго красный используют в виде 3% водного раствора.

Метод Бурри

Техника. Каплю исследуемой культуры смешивают на пред­метном стекле с каплей туши, затем с помощью другого стекла, поставленного к первому под углом в 45°, делают тон­кий мазок по принципу приготовления мазков из крови. Мазок высушивают на воздухе и микроскопируют нефиксированным.

При использовании раствора конго рот после высушива­ния мазок обрабатывают 1% раствором соляной кислоты в аб­солютном алкоголе, затем высушивают и микроскопируют.

Микроскопическая картина: на окрашенном фоне ясно видны неокрашенные светлые микробные клетки.

ОКРАСКА ФИКСИРОВАННЫХ ПРЕПАРАТОВ МИКРООРГАНИЗМОВ

В микробиологической работе наиболее употребительны способы окраски фиксированных микроскопических препаратов, кото­рые в основном можно разделить на две группы: ориентировоч­ные, или простые, и дифференциальные, выявляющие химические и структурные особенности того или иного вида микроорганизма.