Окраска жгутиков

Это одна из наиболее трудных процедур в бактериологиче­ской технике, так как жгутики очень легко повреждаются при приготовлении препарата. Поэтому здесь требуется особая тща­тельность работы. Стекла для препаратов должны быть абсо­лютно чисты и обезжирены. Обычно работают с новыми покров­ными стеклами, которые предварительно кипятят в течение 10 мин в хромовой смеси (двухромовокислого калия 20 г, воды 200 мл, серной кислоты 20 мл; приливать в указанном порядке). После кипячения стекол хромовую смесь сливают, промывают стекла 5 мин в слабом растворе едкого натра, после чего обильно промывают водой, ополаскивают спиртом и хранят в спирте (во время промывания не касаться стекол руками). Пе­ред употреблением стекла вынимают из спирта чистым пинцетом и удаляют спирт обжиганием (ничем не вытирать!).

Исследуемая культура должна быть не старше 12-18 ч. Ма­териал берут осторожным прикосновением петли к культуре и вносят в пробирку с несколькими миллилитрами водопроводной воды, погружая петлю в воду и держа ее неподвижно некоторое время. Повторяют это 2-3 раза, пока не получится тонкая, лишь слегка опалесцирующая взвесь. Полученной взвеси дают постоять 15-20 мин в термостате для равномерного распределе­ния микробов в воде. Затем платиновой петлей переносят каплю на покровное стекло. Если стекло достаточно чисто, капля принимает правильную круглую форму, легко расплывается и бы­стро высыхает на воздухе без подогревания. Препараты фикси­руют на огне и окрашивают специальными способами, причем пе­ред окраской обрабатывают протравой, которая усиливает дей­ствие краски.

Метод Леффлера

Техника. За 1-2 суток до употребления готовят про­траву, состоящую из 1 мл насыщенного спиртового раствора ос­новного фуксина, 10 мл 20% водного раствора танина, 5,5 мл насыщенного на холоду водного раствора сульфата закисного аммиачного железа (соль Мора). Перед употреблением фильт­руют. Препарат, приготовленный на покровном стекле, фикси­руют и помещают на часовое стекло. Наливают протраву и 30-50 с подогревают до отхождения паров. Дав стеклу остыть, его промывают водой и, поместив на другое часовое стекло, красят фуксином Циля 2-3 мин при слабом подогревании. После тща­тельной промывки и высушивания препарат готов для микроско­пирования.

Микроскопическая картина. Жгутики окрашиваются в розово-красный цвет (рис.18).