Техника. Метод Петрука – модификация метода Грея. Вместо карболового фуксина применяют нитрат серебра, раствор которого готовят следующим образом: 1 г АgNОз растворяют в 2 мл дистиллированной воды, к нему по каплям добавляют 5% раствор аммиака до растворения образовавшегося осадка и появления легкой опалесценции. Этот исходный раствор разбавляют в 10 раз дистиллированной водой и применяют для окраски. Препарат с нанесенным на него раствором нитрата серебра слегка подогревают над пламенем.
Микроскопическая картина. Жгутики окрашиваются в желто-коричневый цвет.
Окраска включений в бактериях
Окраска метахроматических зерен (волютина)
Волютин является запасным полифосфатом у некоторых видов бактерий, Его наличие и расположение в клетке может иметь диагностический характер, например, у коринебактерий дифтерии (тельца Бабеша-Эрнста).
Метод Нейссера
Способ 1.
Приготовление краски Нейссера: а) метиленового синего 0,1 г, 95% спирта 2 мл, ледяной уксусной кислоты 5 мл, дистиллированной воды 100 мл; б) раствор хризоидина, или везувина, или бисмаркабраун красителя 1 г, дистиллированной воды 300 мл. Краситель растворяют в кипящей воде и фильтруют через бумагу.
|
|
Техника. Препараты выдерживают по 1 минуте в растворе метиленового синего и в растворе Люголя. Промывают водой. Докрашивают раствором хризоидина (или везувина, или бисмаркбраун) 1-3 мин. Промывают водой.
Микроскопическая картина. Тела бактерий окрашиваются в светло-желтый цвет, зерна Бабеша-Эрнста – в темно-синий.
Способ 2.
Приготовление растворов. Готовят основные растворы:
Раствор 1:
- Метиленового синего – 0,1 г
- Этилового спирта 95° – 2 мл
- Ледяной уксусной кислоты – 5 мл
- Дистиллированной воды – 100 мл
Раствор 2:
- Кристаллвиолета – 1 г
- Этилового спирта 95° – 10 мл
- Дистиллированной воды – 300 мл
Для окраски смешивают две части раствора 1 с одной частью раствора 2.
Техника окраски. На фиксированный мазок наливают смесь растворов 1 и 2, через минуту краску сливают и мазок обрабатывают раствором Люголя в течение минуты, затем промывают водой, докрашивают в течение 2-3 минут раствором хризоидина (1 г краски в 300 мл дистиллированной горячей воды), промывают водой и высушивают.
Микроскопическая картина. Тела бактерий окрашиваются в светло-желтый цвет, зерна волютина (Бабеша-Эрнста) – в темно-синий (рис.19).