Метод Ожешки

Техника. На нефиксированный мазок наливают 0,5% рас­твор хлористоводородной кислоты и подогревают 1-2 мин. С препарата сливают кислоту, промывают его водой и после высы­хания фиксируют на пламени. Фиксированный препарат красят по способу Циля-Нильсена.

Микроскопическая картина. Тела бактерий окрашиваются в синий цвет, споры – в красный (рис.16).

Метод Виртца в модификации Саватеева

Приготовление растворов. К насыщенному водному рас­твору (около 5%) малахитового зеленого добавляют 5% глице­рина, пропитывают смесью полоски фильтровальной бумаги и вы­сушивают их (лучше при 50°С). Затем готовят 0,5% водный рас­твор сафранина, которым смачивают другие полоски фильтро­вальной бумаги и высушивают.

Техника. На фиксированный над пламенем мазок наносят 2-3 капли дистиллированной воды и накладывают по­лоску фильтровальной бумаги, окрашенной малахитовым зеленым. Препарат нагревают над пламенем горелки до появления паров (3-4 раза), приблизительно в течение минуты. При испарении воды ее добавляют. После остывания препарата краску с бумаж­кой смывают струей воды (полминуты) и сейчас же на мокрую поверхность препараты кладут бумажку, окрашенную сафранином. Через 30-40 секунд мазок промывают водой, высушивают и микроскопируют.

Микроскопическая картина. Свободно лежащие споры – зе­леновато-голубого цвета, споры внутри микробных клеток – темно-зеленые, вегетативные формы микробов – красные.

Модификация Шеффлера и Фултона

Техника. На препарат, фиксированный жаром, наносят на 30-60 секунд 5% водный раствор малахитового зеленого и нагревают до появле­ния паров 3-4 раза. Мазок промывают и докрашивают 0,5% водным раствором сафранина в течение 30 секунд. Промывают водой, высушивают через фильтровальную бу­магу.

Микроскопическая картина. Споры зеленые, а вегетативные клетки красные.

Окраска по Биттеру

Техника. Нефиксированный мазок, обработан­ный 10% раствором формалина (10 мин), промытый водой и вы­сушенный, красят аммиачным метиленовым синим (20 мл насы­щенного спиртового раствора метиленового синего, 3 мл креп­кого раствора NH₄0H и 80 мл дистиллированной воды) 3 минуты, нагревая стекло до закипания жидкости. После промывания во­дой и высушивания докрашивают мазок везувином или сафрани­ном 3-5 мин. Вновь промывают, высушивают и микроскопируют.

Микроскопическая картина. В мазке бактерийные тела красные или буро-желтые (в зависимости от краски, примененной для докрашивания), споры синие.