Метод Муха

Окраску применяют для выявления зернистой формы ту­беркулезных микобактерий (зерен Муха).

Техника. В смеси 10 мл насыщенного спиртового раствора метилового фиолетового и 100 мл 2% водного раствора карболовой кислоты препарат выдерживают сутки. Затем его 1-2 мин обрабатывают раствором Люголя, 1 мин – 5% раствором азотной кислоты и 10 с – 3% раствором хлористоводородной ки­слоты. После дифференцирования в смеси, состоящей из равных объемов спирта и ацетона, до прекращения отхождения краски промывают водой, докрашивают фуксином Пфейффера, вновь про­мывают водой и высушивают.

Микроскопическая картина. Микобактерии окрашиваются в фиолетовый цвет.

Метод Козлова

Метод применяют для выявления зернистой формы ту­беркулезных микобактерий.

Техника. Красят 45 мин в смеси: 1 г генциано­вого фиолетового, 6 г карболовой кислоты, 40 мл глицерина и 100 мл дистиллированной воды. Генциановый фиолетовый и кар­боловую кислоту предварительно растирают в ступке, после чего прибавляют глицерин и дистиллированную воду. Перед употреблением краску разводят 3 частями дистиллированной воды и фильтруют. После промывания препарата водой его 20 секунд обрабатывают раствором Люголя, промывают водой, 2-3 с окра­шивают 0,1% раствором сафранина, вновь промывают водой и су­шат.

Микроскопическая картина. Кислотоустойчивые бактерии окрашиваются в фиолетовый цвет.

Выявление клеточной стенки бактерий

При обычных методах окраски мазков клеточная стенка не окрашивается, поэтому применяют специальные методы с про­травами.

Метод Пешкова

Техника. Препарат фиксируют 15 мин в жидкости следующего состава: 90% спирта 60 мл, хлороформа 30 мл и уксусной эссенции 10 мл. Протравливают 2-5 мин в 10% водном растворе танина. За­тем препарат промывают водой, красят 30-60 с фуксином Пфейф­фера и, не промывая, сушат и микроскопируют.

Микроскопическая картина. Клеточная стенка окрашивается в розово-красный цвет.

Метод Гутштейна

Техника. Препарат, 1-2 ч фиксированный в жидкости Буэна, 2-3 мин подвергают действию протравы (5-10% водный раствор танина), ополаскивают водой и микроскопируют в капле 0,01% водного раствора кристаллического фиолетового.

Микроскопическая картина. Клеточная стенка приобретает фиолетовый цвет.