Феномен иммуноклеточного прилипания

Метод, разработанный Г.Дж.В.Носселом с соавторами (1961), основан на способности бактерий прилипать к поверхности малых лимфоцитов – клеток, вырабатывающих специфические антитела после иммунизации животных соответствующими микроорганизмами, и получил название иммуноклеточного прилипания или скучивания. Феномен иммуноклеточного прилипания был использован для дальнейшего совершенствования методов выявления клеток, образующих антитела к антигенам микробного происхождения. В частности, заслуживает внимание модификация метода с использованием в качестве антигена эритроцитов, нагруженных различными микробными гаптенами. Такие эритроциты приобретают способность специфически прикрепляться в опытах in vitro к поверхности изолированных лимфоидных клеток животного, иммунизированного тем микроорганизмом, из которого выделен гаптен. При этом под микроскопом удается наблюдать так называемые розетки, каждая из которых представляет собой лимфоидную антителопродуцирующую клетку, окруженную прочно приставшими к ней эритроцитами. Просмотрев в общей сложности 3000¼4000 лимфоидных клеток в нескольких препаратах, определяют процент розеткообразующих клеток, адсорбировавших не менее двух эритроцитов, - процент адсорбции. Описанный метод был разработан Я.С.Шварцманом и А.В.Исполатовой (1966) и получил название непрямой гемадсорбции по аналогии с реакцией непрямой гемагглютинации. Реакция непрямой гемадсорбции по чувствительности не уступает реакции прилипания бактерий и превосходит ее по специфичности, особенно в тех случаях, когда изучают образование антител к антигенам неподвижных бактерий.

Задания к лабораторному занятию.

1. Постановка развернутой реакции агглютинации.

2. Постановка реакции кольцепреципитации.

3. Демонстрация результатов реакции гемолиза.

4. Демонстрация результатов иммуноферментного анализа.

5. Оформление протокола занятия

Тема: Иммуномодулирующие препараты

Цель: Знать принципы технологии, применения и хранения иммунных препаратов; освоить методы приготовления убитых аутовакцин, антителообразующих гибридом; уметь определять титр сыворотки по Рамону.

Вопросы для самоподготовки

1. Вакцины, их назначение, виды вакцин.

2. Способы получения живых ослабленных вакцин. Понятие об аттенуации. Преимущества и недостатки живых вакцин. Примеры.

3. Способы получения убитых вакцин. Преимущества. Примеры. Понятие об аутовакцинах.

4. Принципы получения химических вакцин. Преимущества. Примеры.

5. Анатоксины: получение, примеры.

6. Методы генной инженерии в разработке новых вакцин. Искусственные вакцины.

7. Аллергены, их получение и использование.

8. Иммунные сыворотки, классификация, назначение.

9. Этапы получения антитоксических сывороток в производственных условиях (иммунизация и гипериммунизация лошадей, получение нативной сыворотки, очистка и концентрация, титрование и контроль).

10. Получение иммуноглобулинов.

11. Моноклональные антитела, применение. Использование гибридомных технологий в получении моноклональных антител.

12. Бактериофаги: получение, применение.

13. Система производства и контроля бактерийных и вирусных препаратов.

14. Методы и условия введения бактерийных и вирусных препаратов.

15. Методика введения гетерогенных (из крови животных) сывороток и иммуноглобулинов с предварительной внутрикожной пробой.

16. Реактогенность бактерийных и вирусных препаратов. Факторы, обусловливающие реактогенность.

17. Оценка и учет послепрививочных реакций. Основные клинические формы поствакцинальных осложнении.

18. Иммунотропные препараты: классификация, применение.

Литература

1. Дикий И.Л., Холупяк И.Ю., Шевелева Н.Е., Стегний М.Ю. Микробио­ло­гия. – Х.: Прапор, Издательство УкрФА, 1999. – С. 361-336.

2. Н.П.Елинов, Н.А.Заикина, И.П.Соколова. Руково­дство к лабораторным занятиям по микробиологии. – М.: Медицина, 1988. – С. 190-191.

Общая характеристика, основы производства