Номер системы | Ингредиент, мл | Номер пробирки | ||
1 Опыт | Контроль сыворотки | Контроль антигена | ||
Исследуемая сыворотка в разведениях 1:5, 1:10, 1:20, 1:40 и т.д. | 0,5 | 0,5 | – | |
Антиген (рабочая доза) | 0,5 | – | 0,5 | |
Комплемент (рабочая доза) | 0,5 | 0,5 | 0,5 | |
Изотонический раствор натрия хлорида | – | 0,5 | 0,5 |
Термостат при температуре 37ºС в течение 1 ч
Гемолитическая система (гемолитическая сыворотка в тройном титре + 3% взвесь эритроцитов барана) | 1,0 | 1,0 | 1,0 |
Термостат при температуре 37ºС в течение 1 ч
Результаты реакции учитывают предварительно – после извлечения пробирок из термостата и окончательно – после пребывания их в течение 15-18 ч в холодильнике или при комнатной температуре.
При окончательном учете интенсивность реакции выражают плюсами: (++++) – резко положительная реакция, характеризующаяся полной задержкой гемолиза (жидкость в пробирке бесцветная, все эритроциты оседают на дно); (+++, ++) – положительная реакция, проявляющаяся усилением окраски жидкости вследствие гемолиза и уменьшением количества эритроцитов в осадке; (+) – слабо положительная реакция (жидкость интенсивно окрашена, на дне пробирки незначительное количество эритроцитов). При отрицательной реакции (–) наблюдается полный гемолиз, жидкость в пробирке имеет интенсивно розовую окраску (лаковая кровь).
|
|
Предложен ряд модификаций РСК, отличающихся повышенной чувствительностью и меньшим объемом используемых ингредиентов. Так, например, при вирусологических исследованиях объем ингредиентов для РСК на холоде – 1 мл. Для капельной РСК берут 1 каплю сыворотки + 1 каплю антигена + 1 каплю комплемента + 2 капли гемолитической системы.
Реакция связывания комплимента нашла самое широкое распространение в микробиологической и серологической диагностике.
С помощью РСК обнаруживают комплементсвязывающие антитела в сыворотке крови больных сифилисом, сапом, хронической гонореей, риккетсиозами, вирусными заболеваниями и др.
Особый интерес РСК представляет для клинической иммунологии. Реакцию применяют для выделения различных субпопуляций лимфоцитов, для выявления антигенов HLA на тромбоцитах, перевиваемых лимфобластах, фибробластах, опухолевых клетках и тромбоцитоспецифических антигенов, а также соответствующих антител.