Измерение роста бактерий

В работе по измерению бактериального роста необходимо пользоваться четким определением роста. Один из главных подходов к определению роста основан на способности микроорганизмов размножаться, т.е. начинать и завершать клеточное деление. Такой подход предполагает возможность контроля увеличивающегося числа дискретных бактериальных частиц. Так как некоторые клетки могут быть мертвыми, вышеуказанное определение роста отличается от определения, основанного на подсчете живых клеток.)

Прямой подсчет общего числа клеток

1. Подсчет под микроскопом в тонком слое с использованием специальных камер (камера Хауксли, камера Петрова-Хаузера).

2. Электронный подсчет. Разбавленная бактериальная суспензия подается через маленькое отверстие (жиклер), соединяющее две камеры с жидкостью. В каждой камере с помощью электродов измеряется электрическое сопротивление. Несмотря на то, что электропроводность среды достаточно велика, размер жиклера настолько мал, что электрическое сопротивление в нем несоизмеримо выше, чем в остальном объеме. Когда частица переносится через жиклер с жидкостью, сопротивление возрастает еще сильнее, так как электропроводность бактерий ниже, чем среды. Эти изменения сопротивления улавливаются с помощью измерительной цепи и превращаются в импульс напряжения или силы тока. Подсчет импульсов подобен подсчету радиоактивности, причем очень слабые импульсы элиминируются с помощью дискриминатора.

3. Метод мембранных фильтров, если на 1 мл приходится менее 10 клеток. Морскую, прудовую или питьевую воду пропускают через мембранный фильтр, затем его сушат, окрашивают, просветляют и производят подсчет клеток под микроскопом.